مبانی نظری تحقیق.. 15

2-1- مقدمه.. 16

2-2- استراتژی و ساختار.. 17

2-2-1- سازمان با استراتژی تدافعی.. 18

2-2-2- سازمانهای آینده نگر.. 18

2-2-3- سازمانهای تحلیلگر.. 18

2-2-4- سازمانهای انفعالی.. 18

2-3- مقایسه چهار نوع استراتژی اسنو و مایلز در تاثیر بر ساختار سازمان.. 19

2-3-1- مقایسه دو استراتژی تمایز و حداقل هزینه در تاثیر بر ساختار سازمان 19

2-3-2- مقایسه دو استراتژی تمایز و حداقل هزینه در تاثیر بر ساختار سازمان 19

2-4- تفاوت ارتفاع ساختاری سازمانها با استراتژی تمایز و حداقل هزینه.. 20

2-5- مدیریت استراتژیک.. 20

2-5-1- نگرش استراتژیک و ارتباط آن با سایر نگرش ها به مدیریت.. 21

2-5-2- نگرش فرآیندی به مدیریت.. 21

2-5-3- نگرش کمی به مدیریت.. 21

2-5-4- نگرش رفتاری به مدیریت.. 22

2-5-5- نگرش سیستمی به مدیریت.. 22

2-5-6- نگرش اقتضائی به مدیریت.. 22

2-5-7- نگرش استراتژیک به مدیریت.. 23

2-6- سطوح استراتژی.. 27

2-6-1- استراتژی سطح شرکت (بنگاه).. 29

2-6-2- استراتژی سطح کسب و کار (تجاری).. 29

2-6-3- استراتژی های کارکردی (وظیفه ای).. 29

2-7- مفهوم هماهنگی استراتژیک.. 30

2-8- مدیریت استراتژیک.. 31

2-8-1- ضرورتهای استفاده از مدیریت استراتژیك.. 32

2-8-2- مزایای بكارگیری مدیریت استراتژیك.. 33

2-9- فرایند مدیریت استراتژیك.. 33

2-9-1- سطوح مدیریت استراتژیک.. 36

2-10- استراتژی های رقابتی پورتر.. 37

2-10-1- استراتژی رهبری قیمت ها.. 40

2-10-1-1- مؤلفه های استراتژیك كاهش هزینه.. 46

2-10-1-2- صرفه جویی به مقیاس.. 48

2-10-1-3- منحنی تجربه.. 48

2-10-1-4- فرهنگ كاهش هزینه.. 48

2-10-2- ریسكهای همراه در استراتژی حداقل هزینه.. 49

2-10-3- استراتژی تمایز.. 49

2-10-3-1- راههایی كه شركتها می توانند محصول یا خدماتشان را متمایز سازند 51

2-10-3-2- عوامل ایجاد تمایز.. 53

2-10-3-3- هزینه در استراتژی تمایز.. 55

2-10-3-4- ریسكهای موجود در استراتژی تمایز.. 55

2-10-3-5- استراتژیهای موفقیت آمیز تمایز.. 55

2-10-3-6- ایجاد ارزش افزوده برای مشتری.. 56

2-10-3-7- ایجاد ارزش ادراكی.. 56

2-10-3-8- دو نگرش در ارتباط با تمایز.. 57

2-10-3-9- انتخاب كیفیت.. 57

2-11- مدیریت كیفیت جامع(TQM). 58

2-11-1- تمركز بر روی مشتری.. 59

2-11-2- نرخ بازگشت سرمایه.. 59

2-12-ارزش ویژه نامتجاری.. 60

2-12-1- آگاهی و شناخت نسبت به نام تجاری.. 61

2-12-2- هویت نام تجاری.. 61

2.12.2.1.. وفاداری نسبت به نام تجاری.. 62

2-12-3- استراتژی تمرکز.. 62

2-12-4- بنگاه بی استراتژی.. 63

2-13- الگوی طبیعی تدوین استراتژی بازاریابی.. 65

2-13-1- الگوی واکر و همکاران.. 66

2-13-2- الگوی ویلسون و گیلیگان.. 67

2-14- الگوی عوامل تاثیرگذار بر استراتژی بازاریابی.. 69

2-14-1- الگوی کریونس.. 69

2-14-2- الگوی سادهازشان.. 70

2-15- الگوی استراتژی بازاریابی: یک چارچوب مثبت.. 70

2-15-1- الگوی مک دانیل و کولاری.. 70

2-16- محصول.. 71

2-17- تحلیل ساختاری صنعت.. 74

2-17-1- تعامل بنگاه و صنعت.. 75

2-17-2- رهبری قیمت متمایز-تمایز ارزان.. 76

2-17-3- سودآوری در طول زمان.. 76

فصل 3. 80

روش تحقیق.. 80

3-1- مقدمه.. 81

3-2- روش و نوع تحقیق.. 81

3-3- جامعه آماری.. 83

3-4- روش نمونه گیری.. 83

3-5- روش گردآوری اطلاعات.. 84

3-6- تركیب سئوالات پرسشنامه.. 84

3-7- روایی ابزار گردآوری اطلاعات.. 85

3-7-1- روایی ظاهری.. 85

3-7-2- روایی محتوا.. 85

3-7-3- روایی پیش بینی.. 85

3-7-4- روایی همگرا و روایی واگرا.. 85

3-8- تعیین پایایی (قابلیت اعتماد) پرسشنامه.. 86

3-8-1- ظرایب آلفای کرونباخ بر هر کدام از متغیرهای مورد بررسی.. 88

3-9- روش تحلیل داده ها.. 88

3-9-1- آزمون tتک نمونه ای( استیودنت) برای میانگین جامعه.. 89

فصل 4. 90

تجزیه و تحلیل داده ها.. 90

فصل 5. 113

نتیجه گیری.. 113

5-1- مقدمه.. 114

5-2- خلاصه ای از نتایج توصیفی.. 114

5-2-1- یافته ها بر حسب زمینه فعالیت.. 114

5-2-2- یافته ها بر حسب سابقه فعالیت.. 114

5-2-3- یافته ها بر حسب حوزه فعالیت.. 114

5-3- بحث در باره یافته ها.. 115

5-4- پیشنهادهای کاربردی.. 122

5-5- پیشنهادهای پژوهشی.. 123

5-6- محدودیت های پژوهش.. 124

فهرست شکل ها

شکل 1 مدل مفهومی تحقیق.. 12

شکل 2 مفهوم استراتژی در سطح ذهنی و مفهومی.. 26

شکل 3 استراتژی سطح شرکت.. 28

شکل 4 فرآیند مدیریت استراتژیک.. 34

شکل 5 چرخه کامل برنامه ریزی، اجرا و کنترل استراتژیک از دیدگاه کاتلر.. 64

شکل 6 رابطه تعاملی و دو طرفه در الگوی طبیعی تدوین استراتژی بازاریابی.. 66

شکل 7 مراحل بازاریابی استراتژیک از دیدگاه ویلسون و گیلیگان.. 68

شکل 8 فرآیند استراتژی بازاریابی از دیدگاه کریونس.. 69

شکل 9 ارتباط بین محیط بازاریابی, تیپ استراتژیک, پاسخ استراتژیک.. 71

2-1-4) تاریخچه رضایت مشتری…………………… 18

2-1-4-1) سیرتکاملی ارتباط با مشتری……………. 18

2-1-4-1-1) تولید انبوه………………………. 18

2-1-4-1-2) دیدگاه تمرکز بر محصول……………… 18

2-1-4-1-3) دیدگاه مبتنی بر فروش………………. 19

2-1-4-1-4) دیدگاه مبتنی بر بازاریابی………….. 19

2-1-4-1-5) دیدگاه مبتنی بر مشتری……………… 19

2-1-4-2) تاریخچه شاخص های ملی رضایت مصرف کننده (مشتری) 21

2-1-5) اهمیت رضایت مصرف کننده………………… 23

2-1-6) راهکارهای رضایت مصرف کننده (مشتری) در بازار 23

2-1-7) نیازها ، انتظارات و رضایت مصرف کنندگان….. 24

2-1-7-1) نیازها…………………………… 24

2-1-7-2)خواسته ها………………………….. 25

2-1-7-3)رضایت مصرف کننده……………………. 25

2-1-8) رقابت تنگاتنگ برای جلب حداکثری رضایت مصرف کننده 26

2-1-9) تولید کیفی ، رویکرد اصولی برای رضایت مصرف کننده (مشتری )………………………………………….. 27

2-1-10) رویکرد اصولی برای رضایت مصرف کننده در ایران 28

2-1-11) تفاوت بین ارزش ادراكی و رضایت مصرف كننده ( مشتری ) 29

2-1-12) پیامدهای رضایت وعدم رضایت مصرف كننده…… 30

2-1-13) نقش اندازه گیری رضایمندی مصرف كننده (مشتری ) 30

2-1-14) روش های اندازه گیری رضایت مصرف كننده (مشتری ) 31

2-1-15) اندازه گیری رضایتمندی مصرف كننده (مشتری ). 32

2-1-15-1) مدل رضایتمندی مشتری كانو…………… 34

2-1-15-2) مدل فورنل…………………………. 35

2-1-15-3) مدل اسکمپر………………………… 36

2-1-15-4)مدل سروکوال(مدل کیفیت خدمات)……….. 37

2-1-16) مدل های اندازه گیری شاخص رضایتمندی…….. 38

2-1-16-1) مدل شاخص رضایت مشتری آمریکا (ACSL)…… 39

2-1-16-2) مدل شاخص رضایت مشتری در اروپا (ECSL)…. 41

2-1-16-3) معرفی مدل شاخص ملی رضایت شغلی سوئیس (SWLCS) 43

2-1-16-4) شاخص ملی رضایت مشتری مالزی (MCSI)……. 45

2-1-17) رابطه بین رضایت مشتری (مصرف کننده) و کیفیت خدمات 46

2-1-18) سیستم جلب رضایت مشتری (مصرف کننده) شرکت مک دونالد 47

2-2بخش دوم) مدل تعالی سازمان EFQM…………… 49

2-2-1) مقدمه……………………………….. 49

2-2-2) ارزیابی تعالی سازمان از گذشته تاکنون……. 49

2-2-3) بررسی تاریخچه EFQM…………………… 51

2-2-4) فواید استفاده از مدل EFQM…………….. 53

2-2-5) ماموریت مدل EFQM…………………….. 54

2-2-6) عوامل شکست مدل EFQM در برخی از سازمانها… 54

2-2-7) EFQM در ا یران………………………. 56

2-2-8) بررسی معیار مشتری محوری مدل بومی شده EFQM در نهاد تعلیم و تربیت……………………………………… 56

2-3) پیشینه تحقیق …………………………. 57

2-3-1) منابع داخلی………………………….. 57

2-3-2) منابع خارجی………………………….. 62

فصل سوم) روش اجرای تحقیق ، مواد و روش ها………. 65

3-1) مقدمه…………………………………. 66

3-2) روش تحقیق……………………………… 66

3-3) جامعه و نمونه آماری…………………….. 67

3-3-1) جامعه آماری………………………….. 67

3-3-2) حجم نمونه و روش نمونه گیری…………….. 67

3-3-3) روش نمونه گیری……………………….. 68

3-4) روش گردآوری داده ها به شیوه میدانی……….. 68

3-5) روائی (اعتبار درونی) پرسشنامه……………. 69

3-6) پایائی (اعتبار بیرونی) پرسشنامه………….. 70

3-7) روش تجزیه و تحلیل داده ها……………….. 71

فصل چهارم : تجزیه تحلیل داده های تحقیق

4-1) مقدمه…………………………………. 73

4-2) بخش اول : آمار توصیفی…………………… 73

4-2-1) فراوانی متغیر جنس…………………….. 73

4-2-2) فراوانی متغیر نوع دانشگاه……………… 74

4-2-3) فراوانی متغیر سال ورود به مقطع ارشد…….. 75

4-2-4) شاخص های توصیفی برای متغیرهای اصلی تحقیق… 76

4-3) بخش دوم : آمار استنباطی…………………. 77

4-3-1) آزمون k-s و نمودار برای آزمون تطابق توزیع داده ها با توزیع نرمال……………………………………… 78

4-3-2) آزمون فرضیه ها……………………….. 79

4-3-2-1) آزمون فرضیه اول…………………….. 79

4-3-2-2) آزمون فرضیه دوم…………………….. 81

4-3-2-3) آزمون فرضیه سوم……………………. 83

4-3-2-4) آزمون فرضیه چهارم…………………… 85

4-3-3) آزمون فریدمن برای اولویت بندی شاخص ها ی اصلی تحقیق به تفکیک دانشگاه ها……………………………. 87

4-3-4) اولویت بندی دانشگاه ها به ترتیب گویه های تحقیق (پرسشنامه)………………………………………….. 89

4-3-4-1) دانشگاه سراسری……………………… 89

4-3-4-2) دانشگاه آزاد……………………….. 91

4-3-4-3)دانشگاه پیام نور……………………. 93

4-3-4-4) دانشگاه غیرانتفاعی………………….. 95

فصل پنجم : بحث ، نتیجه گیری و پیشنهادات

5-1) مقدمه…………………………………. 98

5-2) نتیجه گیری تحقیق……………………….. 98

5-2-1) نتایج آمار توصیفی…………………….. 98

5-2-2) نتایج آمار استنباطی…………………… 99

5-2-2-1)نتیجه آزمون فرضیه اول………………… 99

5-2-2-2)نتیجه آزمون فرضیه دوم………………… 99

5-2-2-3)نتیجه آزمون فرضیه سوم………………… 100

5-2-2-4) نتیجه آزمون فرضیه چهارم……………… 100

5-2-3) سایر نتایج………………………….. 101

5-3) پیشنهادات تحقیق……………………….. 102

5-3-1) پیشنهادات بر اساس یافته های تحقیق……… 102

5-3-2) پیشنهادات برای تحقیقات آتی……………. 104

5-4) محدودیتهای تحقیق………………………. 105

منابع و ماخذ ……………………………… 106

پیوست ها………………………………….. 112

فهرست جداول

عنوان

جدول 2-1) عناوین شاخص های ملی رضایت مشتری در کشور همراه با سال ابداع آن…………………………………… 22

جدول 2-2) جدول نوآوری ها در مدل اسکمپر………… 36

جدول 2-3) شاخصهای و عوامل مدل ECSI …………… 42

جدول 2-4) جدول جمع بندی نتایج مطالعاتی………… 42

جدول 3-1) ضرایب آلفا کرونباخ برای سازه های تحقیق.. 70

جدول 4-1) جدول فراوانی و نمودار برای متغیر جنس…. 73

جدول 4-2) جدول فراوانی و نمودار برای متغیر نوع دانشگاه 74

جدول 4-3) جدول فراوانی و نمودار برای متغیر سال ورود به مقطع ارشد………………………………………….. 76

جدول 4-4) شاخص های توصیفی برای متغیر های اصلی تحقیق 77

جدول 4-5) آزمون کولموگراف اسمیر نوف برای تطابق توزیع مشاهدات با توزیع نرمال………………………………… 78

جدول 4-6)جدول آزمون کراسکال والیس برای متغییر خدمات آموزشی 79

جدول 4-7) جدول آماره آزمون متغییر خدمات آموزشی…. 79

جدول 4-8) جدول آزمون کراسکال والیس برای متغییر خدمات پیگیرانه بعد از ارائه آموزش……………………………… 81

جدول 4-9) جدول آماره آزمون متغییر خدمات پیگیرانه بعد از ارائه آموزش……………………………………… 81

جدول 4-10) جدول آزمون کراسکال والیس برای متغییر تصویر و نگرش از دانشگاه……………………………………. 83

جدول 4-11) جدول آماره آزمون متغییر تصویر و نگرش از دانشگاه 83

جدول 4-12) جدول آزمون کراسکال والیس برای متغییر وفاداری به دانشگاه………………………………………….. 85

جدول 4-13) جدول آماره آزمون برای متغییر وفاداری به دانشگاه 85

جدول 4-14) آزمون رتبه بندی شاخص های اصلی تحقیق به تفکیک دانشگاه ها………………………………………… 87

جدول 4-15) آماره آزمون فریدمن برای دانشگاه سراسری. 89

جدول 4-16) رتبه بندی گویه های پرسشنامه به ترتیب اهمیت از دید دانشجویان دانشگاه سراسری…………………….. 90

جدول4-17) آماره آزمون فریدمن برای دانشگاه آزاد…. 91

جدول 4-18) رتبه بندی گویه های پرسشنامه به ترتیب اهمیت از دید دانشجویان دانشگاه آزاد

………………………………………….. 92

جدول4-19) آماره آزمون فریدمن برای دانشگاه پیام نور 93

جدول 4-20) رتبه بندی گویه های پرسشنامه به ترتیب اهمیت از دید دانشجویان دانشگاه پیام نور…………………… 94

جدول4-21) آماره آزمون فریدمن برای دانشگاه غیرانتفاعی95

جدول 4-22) رتبه بندی گویه های پرسشنامه به ترتیب اهمیت از دید دانشجویان دانشگاه غیرانتفاعی…………………. 96

فهرست نمودارها

عنوان

4-1) نمودار دایره ای برای متغیر جنسیت پاسخ دهندگان 74

4-2) نمودار میله ای برای متغیر نوع دانشگاه…….. 75

4-3) نمودار دایره ای برای متغیر سال ورود به مقطع کارشناسی ارشد………………………………………….. 76

4-4) نمودار میله ای برای میانگین خدمات آموزشی….. 80

4-5) نمودار میله ای برای میانگین ارائه خدمات پیگیرانه بعد از آموزش از سوی گروه آموزشی و دانشگاه…………………. 82

4-6) نمودار میله ای برای میانگین تصویر و نگرش از دانشگاه و گروه آموزشی…………………………………….. 84

4-7) نمودار میله ای برای میانگین وفاداری به گروه آموزشی و دانشگاه………………………………………….. 86

فهرست اشکال

عنوان

شکل 1-1) چارچوب مدل تعالی عملکرد اروپا EFQM…… 5

شکل 1-2) مدل علت معلولی پیشنهادی ایزدی (مدل بومی پژوهش) 6

شکل 2-1) سیر تکاملی ارتباط مشتری……………… 20

شکل 2-2) مزایای جلب رضایت مشتریان…………….. 26

شکل 2-3) روش های اندازه گیری رضایت مشتری………. 32

شکل 2-4) ماتریس تقسیم بندی مدل های اندازه گیری رضایتمندی مشتری………………………………………….. 33

نگاه و روایت سوم. 30

5. چالش های نظری فراروی علم دینی.. 33

فصل دوم:گزارش و سنجش دیدگاه دكتر عبدالكریم سروش

مقدمه. 37

بخش اول: رویكرد مثبت و ایجابی به علم دینی.. 38

1. مقصود از علوم انسانی.. 38

1. تجربی بودن علوم انسانی.. 39

1. تعریف علوم انسانی.. 40

1. تفكیك مقام گردآوری از مقام داوری.. 41

1. وابستگی علم به جهان بینی و ایدئولوژی عالِم در مقام گردآوری.. 42

1. اسلامی كردن علوم انسانی.. 45

جمع بندی.. 47

بخش دوم: رویكرد انتقادی و سلبی به علم دینی.. 49

1. عوامل و انگیزه های دینی كردن علم. 49

نقد و سنجش…. 50

2. علم دینی در مقام ثبوت و نفس الأمر. 53

نقد و سنجش…. 54

3. علم دینی و فرایند تكوین علوم. 55

نقد و سنجش…. 58

4. شواهدی تاریخی بر بی نتیجه بودن ایده علم دینی.. 61

نقد و سنجش…. 63

5. علم دینی ممكن امّا نامطلوب… 64

نقد و سنجش…. 65

جمع بندی.. 69

فصل سوم:گزارش و سنجش دیدگاه آقای مصطفی ملكیان

مقدمه. 75

1. مقصود از علم دینی.. 75

1. نقصان علوم انسانی موجود. 77

نقد و سنجش…. 80

3. تعارض علم و دین.. 84

نقد و سنجش…. 87

4. امكان علم دینی.. 91

الف) تصحیح علوم موجود. 91

نقد و سنجش…. 92

ب) تأسیس علوم جدید. 93

انتقاد اول. 94

نقد و سنجش…. 95

انتقاد دوم. 98

نقد و سنجش…. 99

انتقاد سوم. 102

نقد و سنجش…. 103

ج) الهام گرفتن از گزاره های دینی در ساخت نظریّه های علمی.. 106

نقد و سنجش…. 106

5. مطلوبیّت علم دینی.. 107

نقد و سنجش…. 109

جمع بندی.. 111

فصل چهارم: گزارش و سنجش دیدگاه دكتر علی پایا

مقدمه. 119

1. تفاوت علم و فناوری.. 120

نقد و سنجش…. 124

2. امتناع علم دینی و امکان فناوری دینی.. 126

نقد و سنجش…. 127

3. علم دینی و حوزه علوم انسانی و اجتماعی.. 129

نقد و سنجش…. 131

4. نقد استدلال های مدافعان علم دینی.. 132

الف) نقد دیدگاه آقای ریاحی و همكاران. 133

ب) نقد دیدگاه دكتر خسرو باقری.. 134

نقد و سنجش…. 137

ج) نقد دیدگاه آقای بستان. 139

نقد و سنجش…. 140

جمع بندی.. 141

فصل پنجم: گزارش و سنجش دیدگاه دكتر بیژن عبد الكریمی

مقدمه. 145

1. طرح علوم انسانی اسلامی، ایده ای تاریك و ناروشن! 146

الف) معانی «دین یا الهیات» و «علوم انسانی». 146

ب) صورت بند ی های مسأله. 147

نقد و سنجش…. 151

2. طرح علم دینی یا شرق شناسی وارونه؟. 157

2-1- تجهیزات و دستگاه های مورد استفاده…………………………………………………………………………………………………18

2-2- مواد مصرفی و نحوه ساخت………………………………………………………………………………………………………………19

2-3- بخش آزمایشگاهی…………………………………………………………………………………………………………………………21

2-4- سویه های باکتری استفاده شده…………………………………………………………………………………………………………21

2-5- ناقل های استفاده شده………………………………………………………………………………………………………………………21

2-6-طراحی وسنتز ژن nsLTP2 برنج ایرانی……………………………………………………………………………………………..22

2-7- شرایط استریل کردن……………………………………………………………………………………………………………………….25

2-8-محیط کشت لوریا برتانی (LB)…………………………………………………………………………………………………………25

2-9- آنتی بیوتیک…………………………………………………………………………………………………………………………………26

2-10- شرایط کشت و نگهداری سویه های باکتری اشرشیا کلی………………………………………………………………………26

2-10-1- طرز تهیه استوک گلیسرول…………………………………………………………………………………………………………26

2-11- استخراج ناقل………………………………………………………………………………………………………………………………26

2-11-1- استخراج ناقل با روش لیز قلیایی……………………………………………………………………………………………………26

2-11-1-1- روش انجام استخراج ناقل با روش لیز قلیایی…………………………………………………………………………………28

2-11-2- استخراج ناقل با استفاده از کیت شرکت بیو بیسیک………………………………………………………………………….30

2-11-2-1- روش انجام استخراج ناقل با استفاده از کیت شرکت بیوبیسیک……………………………………………………….31

2-12- الکتروفورز DNA بر روی ژل آگارز………………………………………………………………………………………………32

2-12-1- مواد لازم جهت الکتروفورز DNA بر روی ژل آگارز……………………………………………………………………..32

2-12-1-1- بافر TAE…………………………………………………………………………………………………………………………..32

2-12-1-2- بافر TBE…………………………………………………………………………………………………………………………..33

2-12-1-3-تهیه ژل آگارز………………………………………………………………………………………………………………………33

2-12-1-4- نشانگر اندازه DNA…………………………………………………………………………………………………………….34

2-12-1-5-رنگ سایبر گرین………………………………………………………………………………………………………………….35

2-12-1-6- بافر بارگذاری………………………………………………………………………………………………………………………36

2-12-2- تعیین اندازه و غلظت DNA توسط الکتروفورز………………………………………………………………………………36

2-12-3- تخمین غلظت DNA با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر………………………………………………………………….36

2-13- تهیه سلول های مستعد از باکتری اشرشیاکلی با روش شیمیایی………………………………………………………………..37

2-13-1- مواد لازم………………………………………………………………………………………………………………………………..37

2-13-2- تهیه سلول مستعد………………………………………………………………………………………………………………………38

2-14- ترانسفورماسیون با روش شوک گرمایی…………………………………………………………………………………………….38

2-14-1- روش انجام ترانسفورماسیون………………………………………………………………………………………………………..39

2-15- هضم آنزیمی با آنزیم های محدود کننده…………………………………………………………………………………………..40

2-15-1- مواد لازم برای هضم آنزیمی با آنزیم های محدود کننده……………………………………………………………………40

2-15-1-1- آنزیم (Thermo scientific) XhoI…………………………………………………………………………………..42

2-15-1-2- آنزیم (Thermo Scientific) NcoI…………………………………………………………………………………..42

2-15-1-3 آنزیم BpiI (Thermo Scientific)……………………………………………………………………………………..42

2-16- خالص سازی DNA از ژل…………………………………………………………………………………………………………….42

2-16-1- مواد لازم برای خالص سازی DNA از ژل……………………………………………………………………………………43

2-16-2- روش انجام استخراج DNA از ژل………………………………………………………………………………………………43

2-17- تکنیک الحاق………………………………………………………………………………………………………………………………44

2-17-1-مواد لازم برای تکنیک الحاق……………………………………………………………………………………………………….44

2-17-2- روش انجام تکنیک الحاق…………………………………………………………………………………………………………..45

2-18- واکنش کلنی PCR……………………………………………………………………………………………………………………..45

2-18-1- روش انجام واکنش کلنی- PCR………………………………………………………………………………………………..45

2-19- تعیین توالی ژن rice-nsLTP2……………………………………………………………………………………………………..47

2-20-مطالعات بیوانفورماتیکی…………………………………………………………………………………………………………………47

2-20-1-نرم افزار ها و سرورهای مورد استفاده…………………………………………………………………………………………….47

2-20-2-برر سی توالی nsLTP2…………………………………………………………………………………………………………….48

2-20-3-بررسی هیدروفوبیسیته یnsLTP2 برنج ایرانی………………………………………………………………………………49

2-20-4-بررسی خاصیت آنتی ژنیسیتی nsLTP2 برنج ایرانی ……………………………………………………………………….50

2-20-5-Molecular Docking………………………………………………………………………………………………………….51

فصل سوم:نتایج

3-1-استخراج ناقل های pET26b و pUC57 با روش لیز قلیایی ………………………………………………………………52

3-2-نتایج هضم آنزیمی ناقل pET26b وقطعه ی nsLTP2 جهش یافته……………………………………………………….53

3-3-نتایج خالص سازی از ژل………………………………………………………………………………………………………………….54

3-4-واکنش الحاق………………………………………………………………………………………………………………………………..55

3-5-ترانسفورماسیون ناقل pET26b نوترکیب ایجاد شده…………………………………………………………………………..56

3-6-غربالگری ناقل های pET26b حاوی ژن nsLTP2 جهش یافته…………………………………………………………..57

3-6-1-واکنش کلنی-PCR…………………………………………………………………………………………………………………..57

3-6-2-نتایج استخراج ناقل های pET26b نوترکیب…………………………………………………………………………………58

3-6-3- نتایج هضم آنزیمی ناقل نوترکیب…………………………………………………………………………………………………59

3-6-4-نتایج تعیین توالی قطعه ی وارد شده به ناقل pET26b………………………………………………………………………60

3-7-نتایج بخش بیوانفورماتیک………………………………………………………………………………………………………………..61

3-7-1- بررسی ساختار اول پروتئین nsLTP2 برنج …………………………………………………………………………………..61

3-8- جهش زایی پروتئین nsLTP2 برنج ایرانی و Molecular Docking…………………………………………………67

فصل چهارم:بحث و نتیجه گیری

4-1 –کلیات…………………………………………………………………………………………………………………………………………68

4-2- مقایسهnsLTP2 و nsLTP1 ……………………………………………………………………………………………………….69

4-3- سنتز ژن جهش یافته nsLTP2 گیاه برنج ایرانی ………………………………………………………………………………….70

4-4 -همسانه سازی ژن جهش یافته ی nsltp2 برنج ایرانی……………………………………………………………………………..71

4-5- بررسی نوع وحشی و جهش یافته nsLTP2 گیاه برنج ایرانی…………………………………………………………………..71

4-6- بررسی خاصیت آنتی ژنیسیتی nsLTP2 گیاه برنج ایرانی………………………………………………………………………72

4-7- نتیجه گیری کلی…………………………………………………………………………………………………………………………….74

4-8- پیشنهادات جهت تحقیقات آینده……………………………………………………………………………………………………….75

فهرست شکل ها

عنوان صفحه

شکل1-1-تصویر شماتیک ناحیه ی کد کننده ی ژنLTP2 گیاه برنج ایرانی………………………………………………………5

شکل1-2-بررسی توالی nsLTP1 و nsLTP2 در برخی از گیاهان……………………………………………………………….5

شکل1-3-الگوی تشکیل چهار نوع پیوند دی سولفیدی در دو نوع LTP موجود در گیاه برنج………………………………6

شکل1-4-توالی و ساختار LTP1………………………………………………………………………………………………………………8

شکل 1-5-توالی و ساختار LTP2…………………………………………………………………………………………………………….9

شکل1-6-نمای کلی از وجود ساختار های ثانویه ی آلفا هلیکس در ساختار LTP1 و LTP2……………………………..9

شکل 1-7-تطابق اسید آمینه ای آلرژن های LTP……………………………………………………………………………………….12

شکل1-8-برهمکنش ترکیبات مختلف از جمله کلسترول وانواع LTP ،………………………………………………………….16

شکل2-1-دیاگرام شماتیک نقشه ی ژنتیکی pET26b………………………………………………………………………………..22

شکل 2-2-دیاگرام شماتیک نقشه ی ژنتیکی pUC57…………………………………………………………………………………23

شکل2-3-توالی ژنی طراحی شده ی nsLTP2 برنج ایرانی…………………………………………………………………………..24

شکل2-4-اندازه نمایDNA…………………………………………………………………………………………………………………..35

شکل2-5-نمایی شماتیک از واکنش ترانسفورماسیون…………………………………………………………………………………..40

شکل3-1-نتایج استخراج ناقل با کیت استخراج پلازمید شرکت بیوبیسیک……………………………………………………….53

شکل3-2-نتایج هضم آنزیمی…………………………………………………………………………………………………………………..54

شکل3-3-بررسی کیفیت قطعات استخراج شده از ژل…………………………………………………………………………………..55

شکل 3-4-نتایج تهیه ی سلول های مستعد………………………………………………………………………………………………….56

شکل3-5-نتایج ترانسفورماسیون ناقل pET26b…………………………………………………………………………………………57

شکل 3-6-نتیجه ی کلونی- PCR ………………………………………………………………………………………………………..58

شکل 3-7-استخراج ناقل pET26b نوترکیب……………………………………………………………………………………………59

شکل3-8-بررسی هضم آنزیمی ناقل نوترکیب…………………………………………………………………………………………….60

شکل3-9-نتیجه ی توالی یابی جهش های F39A و L28A ……………………………………………………………………..61

شکل3-10-بخش های غشاء گذر و هیدروفوب پروتئین nsLTP2 با روش TMHMM………………………………….63

شکل3-11-نواحی هیدروفوب توالی پروتئینی nsLTP2 با روش Sliding Widow……………………………………….64

شکل 3-12-. میانگین میزان آنتی ژنیسیته ی آمینو اسید های توالی پروتئینی nsLTP2 در حالت طبیعی………….65

شکل3-13- میانگین میزان آنتی ژنیسیته ی آمینو اسید های توالی پروتئینی nsLTP2 در توالی جهش یافته………………….65

شکل3-14- ساختار شیمیایی LysoPC14 ……………………………………………………………………………………………..67

فهرست جدول ها

عنوان صفحه

جدول1-1- ساختار های LTP1 بررسی شده به وسیله ی NMR و کریستالوگرافی اشعه ی X……………………………7

جدول 2-1-تجهیزات و دستگاه های مورد استفاده……………………………………………………………………………………….19

جدول2-2- فهرست مواد مورد استفاده……………………………………………………………………………………………………..20

جدول 2-3- ترکیبات محیط کشت LB…………………………………………………………………………………………………….25

جدول2-4- مواد لازم برای ساخت محلول I استخراج ناقل……………………………………………………………………………27

جدول 2-5-مواد لازم برای ساخت محلول II استخراج ناقل…………………………………………………………………………..27

جدول 2-6-مواد لازم برای ساخت محلول III استخراج ناقل……………………………………………………………………….28

جدول 2-7-مواد لازم برای ساخت محلول TE…………………………………………………………………………………………..28

جدول 2-8-محتویات کیت استخراج ناقل بیوبیسیک……………………………………………………………………………………30

جدول 2-9 مواد لازم برای ساخت بافر TAE10X…………………………………………………………………………………….32

جدول2-10- مواد لازم برای ساخت بافر TBE10X…………………………………………………………………………………..33

جدول 2-11-ترکیب بافر بارگذاری 6X……………………………………………………………………………………………………36

جدول 2-12- مواد لازم جهت تهیه سلول مستعد………………………………………………………………………………………….37

جدول 2-13-غلظت آنتی بیوتیک برای انتخاب سویه ی مقاوم……………………………………………………………………….39

جدول 2-14-ترکیبات لازم برای واکنش هضم آنزیمی دوگانه ب برای ناقل pET26b…………………………………….41

جدول2-15-ترکیبات لازم برای واکنش هضم آنزیمی دوگانه برای ناقل pUC57 …………………………………………..41

جدول 2-16-محتویات کیت استخراج DNA از ژل بیونیر……………………………………………………………………………43

جدول 2-17-ترکیبات لازم برای واکنش اتصال با استفاده از ناقل pET26b……………………………………………………45

جدول2-18-مواد مورد نیاز برای PCR…………………………………………………………………………………………………….46

جدول 2-19-برنامه ی زمانی و دمایی واکنش کلنی PCR……………………………………………………………………………47

جدول2-20-نرم افزار ها و سرورهای مورد استفاده……………………………………………………………………………………….48

جدول 2-21-میزان هیدروفوبیسیته ی هر آمینو اسید……………………………………………………………………………………..49

جدول2-22-پارامتر های تنظیم شده در زمان Docking……………………………………………………………………………..51

جدول3-1- ویژگی های فیزیکو شیمیایی nsLTP2 برنج ایرانی…………………………………………………………………..62

جدول 3-2-موتیف ها و محل قرار گیری آن ها روی توالی nsLTP2 برنج ایرانی……………………………………………63

جدول 3-3-نواحی آنتی ژن توالی پروتئینی nsLTP2 برنج ایرانی………………………………………………………………..64

جدول 3-4-نواحی آنتی ژنیک موجود در توالی nsLTP2 برنج ایرانی که با MHC-II واکنش می دهد……………66

…. 15

2-2-5-3- اثر دما بر واكنش های بیوشیمیایی……………………………………………………………… 16

2-3- زنبورهای پارازیتوئید بالا خانواده Bethyloidea………………………………………………… 17

2-4- خانواده Bethylidae …………………………………………………………………………………. 17

2-4-1- مرفولوژی خانواده Bethylidae ……………………………………………………………….. 17

فصل سوم : مواد وروشها

3-1- جمع آوری و شناساییGoniozusspp.………………………………………………………… 20

3-2- پرورش آزمایشگاهی پارازیتوئیدGoniozusspp.و کرم میوه خوار خرما……………….. 21

3-2-1- پرورش کرم میوه خوار خرما……………………………………………………………………….. 21

3-2-2- پرورش زنبور پارازیتوئید……………………………………………………………………………. 22

3-3- بررسی زیست شناسی زنبورهای پارازیتوئید………………………………………………………… 24

3-3-1- طول عمر زنبورهای نر و ماده و طول دوره باروری ………………………………………….. 24

3-4- بررسی الگوی تخمگذاری زنبورهای پارازیتوئید……………………………………………………. 26

3-5- بررسی رابطه وزن میزبان و تعداد تخم گذاشته شده………………………………………………. 26

3-6-تجزیه وتحلیل داده ها…………………………………………………………………………………….. 26

فصل چهارم : نتایج

4-1- جمع آوری و شناسایی زنبورهای پارازیتوئید کرم میوه خوار خرما…………………………….. 27

4-2- شكل شناسی زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. (تخم، لارو، شفیره و حشره بالغ)……. 28

4-3- زیست شناسی زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp.…………………………………………….32

4-3-1- طول دوره زندگی (تخم، لارو، شفیره و حشره بالغ)………………………………………….. 34

4-3-2- رفتار تخم گذاری…………………………………………………………………………………….. 36

4-3-3- طول عمر زنبورهای نر و ماده………………………………………………………………………. 38

4-3-4- بررسی نسبت جنسی زنبورهای نر و ماده بر روی مراحل مختلف رشدی کرم میوه خوار خرما 38

4-4- تعیین الگوی تخمگذاری زنبورهای پارازیتوئید…………………………………………………….. 39

4-5- بررسی رابطه وزن میزبان و تعداد تخم گذاشته شده………………………………………………. 42

فصل پنجم: بحث

پیوست ها……………………………………………………………………………………………………………. 59

فهرست منابع……………………………………………………………………………………………………….. 62

Abstract ………………………………………………………………………………………………………… 65

فهرست جداول

جدول شماره4-1- زیست شناسی زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. بر روی کرم میوه خوار خرما

در شرایط آزمایشگاهی، دما 1±28 درجه سانتی گراد، رطوبت نسبی 5±60 درصد، 14ساعت روشنایی

و10 ساعت تاریکی……………………………………………………………………………………………… 36

جدول شماره 4-2- الگوی تخمگذاری در شرایط آزمایشگاهی 2±26 درجه سانتی گراد، رطوبت

نسبی60-70 درصد و 14 ساعت روشنایی و 10 ساعت تاریکی…………………………………….. 39

جدول شماره 4-3-تجزیه واریانس پراکنش تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی

سطوح لاروی کرم میوه خوار خرما بدون در نظر گرفتن قفسه سینه و شکم ………………………………………………………………………………………………………………………… 40

جدول شماره 4-4- تجزیه واریانس بین گروه ها و داخل گروه ها 41

جدول شماره4-5- جدول فراوانی تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی سطوح لاروی

کرم میوه خوار خرما …………………………………………………………………………. 41

جدول شماره4-6- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئید spp.Goniozus

روی سطوح لاروی کرم میوه خوار خرما. ………………………………………. 42

جدول شماره 4-7- جدول تجزیه واریانس تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی

بندهای لارو کرم میوه خوار خرما…………………………………………………. 42

جدول شماره 4-8- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGomiozusspp. روی قفسه سینه و شکم لارو کرم میوه خوار خرما ……………………………………………………………………………………………………………… 43

جدول شماره 4-9- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGomiozusspp.

در نواحی مختلف بدن لارو کرم میوه خوار خرما………………….. 43

جدول شماره4-10- جدول تجزیه واریانس تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی

بندهای شکم و قفسه سینه لارو کرم میوه خوار خرما………… 44

جدول شماره 4-11- جدول گروه بندی میانگین تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp.

روی نواحی مختلف بدن لارو کرم میوه خوار خرما (بر اساس قانون دانکن) ………………………………………………………………………………………………………………………… 45

جدول شماره 4-12- تعداد تخم گذاشته شده توسط زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی لارو

کرم میوه خوار خرما………………………….. 47

فهرست نمودار

نمودار شماره 4-1- نمودار تجمعی نتایج پیش بینی شده و نتایج مشاهدات…………………………. 47

فهرست اشكال

عکس2-1- مورفولوژی زنبورهای خانواده Bethyloidea ……………………………………………. 19

عکس3- 1- انكوباتور حاوی ظروف پرورش زنبورهای پارازیتوئید…………………………………… 22

عکس3-2- اتاق پرورش بخش تحقیقات حشره شناسی كشاورزی…………………………………… 23

عکس3-3- ظروف بررسی رفتار زنبورهای پارازیتوئید در اتاق پرورش……………………………… 23

عکس 3-4- پتری دیشهای بررسی نسبت جنسی زنبورهای پارازیتوئید………………………………. 25

عکس3-5- ظروف بررسی الگوی تخمگذاری……………………………………………………………… 26

عکس4 -1- رگبندی بال جلویی درGoniozusspp…………………………………………………. 27

عکس4 -2- تخم بیضی شکل، موازی محور طولی بدن………………………………………………….. 28

عکس 4-3- تخمگذاری به صورت دسته جمعی………………………………………………………….. 29

عکس 4-4- مراحل اولیه لاروی………………………………………………………………………………. 29

عکس 4-5- مرحله انتهای لاروی…………………………………………………………………………….. 30

عکس 4-6- سوراخ دایره ای شکل، محل خروج حشره کامل از پیله ابریشمی سفید…………….. 31

عکس 4-7- حشره بالغ زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp………………………………………….. 32

عکس 4-8- سطح شکمی شفیره بدون پیله…………………………………………………………………. 33

عکس 4-9- سطح پشتی شفیره بدون پیله…………………………………………………………………… 34

عکس4-10- حشره بالغ زنبور پارازیتوئید (نر)…………………………………………………………….. 35