2-1- تجهیزات و دستگاه های مورد استفاده…………………………………………………………………………………………………18

2-2- مواد مصرفی و نحوه ساخت………………………………………………………………………………………………………………19

2-3- بخش آزمایشگاهی…………………………………………………………………………………………………………………………21

2-4- سویه های باکتری استفاده شده…………………………………………………………………………………………………………21

2-5- ناقل های استفاده شده………………………………………………………………………………………………………………………21

2-6-طراحی وسنتز ژن nsLTP2 برنج ایرانی……………………………………………………………………………………………..22

2-7- شرایط استریل کردن……………………………………………………………………………………………………………………….25

2-8-محیط کشت لوریا برتانی (LB)…………………………………………………………………………………………………………25

2-9- آنتی بیوتیک…………………………………………………………………………………………………………………………………26

2-10- شرایط کشت و نگهداری سویه های باکتری اشرشیا کلی………………………………………………………………………26

2-10-1- طرز تهیه استوک گلیسرول…………………………………………………………………………………………………………26

2-11- استخراج ناقل………………………………………………………………………………………………………………………………26

2-11-1- استخراج ناقل با روش لیز قلیایی……………………………………………………………………………………………………26

2-11-1-1- روش انجام استخراج ناقل با روش لیز قلیایی…………………………………………………………………………………28

2-11-2- استخراج ناقل با استفاده از کیت شرکت بیو بیسیک………………………………………………………………………….30

2-11-2-1- روش انجام استخراج ناقل با استفاده از کیت شرکت بیوبیسیک……………………………………………………….31

2-12- الکتروفورز DNA بر روی ژل آگارز………………………………………………………………………………………………32

2-12-1- مواد لازم جهت الکتروفورز DNA بر روی ژل آگارز……………………………………………………………………..32

2-12-1-1- بافر TAE…………………………………………………………………………………………………………………………..32

2-12-1-2- بافر TBE…………………………………………………………………………………………………………………………..33

2-12-1-3-تهیه ژل آگارز………………………………………………………………………………………………………………………33

2-12-1-4- نشانگر اندازه DNA…………………………………………………………………………………………………………….34

2-12-1-5-رنگ سایبر گرین………………………………………………………………………………………………………………….35

2-12-1-6- بافر بارگذاری………………………………………………………………………………………………………………………36

2-12-2- تعیین اندازه و غلظت DNA توسط الکتروفورز………………………………………………………………………………36

2-12-3- تخمین غلظت DNA با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر………………………………………………………………….36

2-13- تهیه سلول های مستعد از باکتری اشرشیاکلی با روش شیمیایی………………………………………………………………..37

2-13-1- مواد لازم………………………………………………………………………………………………………………………………..37

2-13-2- تهیه سلول مستعد………………………………………………………………………………………………………………………38

2-14- ترانسفورماسیون با روش شوک گرمایی…………………………………………………………………………………………….38

2-14-1- روش انجام ترانسفورماسیون………………………………………………………………………………………………………..39

2-15- هضم آنزیمی با آنزیم های محدود کننده…………………………………………………………………………………………..40

2-15-1- مواد لازم برای هضم آنزیمی با آنزیم های محدود کننده……………………………………………………………………40

2-15-1-1- آنزیم (Thermo scientific) XhoI…………………………………………………………………………………..42

2-15-1-2- آنزیم (Thermo Scientific) NcoI…………………………………………………………………………………..42

2-15-1-3 آنزیم BpiI (Thermo Scientific)……………………………………………………………………………………..42

2-16- خالص سازی DNA از ژل…………………………………………………………………………………………………………….42

2-16-1- مواد لازم برای خالص سازی DNA از ژل……………………………………………………………………………………43

2-16-2- روش انجام استخراج DNA از ژل………………………………………………………………………………………………43

2-17- تکنیک الحاق………………………………………………………………………………………………………………………………44

2-17-1-مواد لازم برای تکنیک الحاق……………………………………………………………………………………………………….44

2-17-2- روش انجام تکنیک الحاق…………………………………………………………………………………………………………..45

2-18- واکنش کلنی PCR……………………………………………………………………………………………………………………..45

2-18-1- روش انجام واکنش کلنی- PCR………………………………………………………………………………………………..45

2-19- تعیین توالی ژن rice-nsLTP2……………………………………………………………………………………………………..47

2-20-مطالعات بیوانفورماتیکی…………………………………………………………………………………………………………………47

2-20-1-نرم افزار ها و سرورهای مورد استفاده…………………………………………………………………………………………….47

2-20-2-برر سی توالی nsLTP2…………………………………………………………………………………………………………….48

2-20-3-بررسی هیدروفوبیسیته یnsLTP2 برنج ایرانی………………………………………………………………………………49

2-20-4-بررسی خاصیت آنتی ژنیسیتی nsLTP2 برنج ایرانی ……………………………………………………………………….50

2-20-5-Molecular Docking………………………………………………………………………………………………………….51

فصل سوم:نتایج

3-1-استخراج ناقل های pET26b و pUC57 با روش لیز قلیایی ………………………………………………………………52

3-2-نتایج هضم آنزیمی ناقل pET26b وقطعه ی nsLTP2 جهش یافته……………………………………………………….53

3-3-نتایج خالص سازی از ژل………………………………………………………………………………………………………………….54

3-4-واکنش الحاق………………………………………………………………………………………………………………………………..55

3-5-ترانسفورماسیون ناقل pET26b نوترکیب ایجاد شده…………………………………………………………………………..56

3-6-غربالگری ناقل های pET26b حاوی ژن nsLTP2 جهش یافته…………………………………………………………..57

3-6-1-واکنش کلنی-PCR…………………………………………………………………………………………………………………..57

3-6-2-نتایج استخراج ناقل های pET26b نوترکیب…………………………………………………………………………………58

3-6-3- نتایج هضم آنزیمی ناقل نوترکیب…………………………………………………………………………………………………59

3-6-4-نتایج تعیین توالی قطعه ی وارد شده به ناقل pET26b………………………………………………………………………60

3-7-نتایج بخش بیوانفورماتیک………………………………………………………………………………………………………………..61

3-7-1- بررسی ساختار اول پروتئین nsLTP2 برنج …………………………………………………………………………………..61

3-8- جهش زایی پروتئین nsLTP2 برنج ایرانی و Molecular Docking…………………………………………………67

فصل چهارم:بحث و نتیجه گیری

4-1 –کلیات…………………………………………………………………………………………………………………………………………68

4-2- مقایسهnsLTP2 و nsLTP1 ……………………………………………………………………………………………………….69

4-3- سنتز ژن جهش یافته nsLTP2 گیاه برنج ایرانی ………………………………………………………………………………….70

4-4 -همسانه سازی ژن جهش یافته ی nsltp2 برنج ایرانی……………………………………………………………………………..71

4-5- بررسی نوع وحشی و جهش یافته nsLTP2 گیاه برنج ایرانی…………………………………………………………………..71

4-6- بررسی خاصیت آنتی ژنیسیتی nsLTP2 گیاه برنج ایرانی………………………………………………………………………72

4-7- نتیجه گیری کلی…………………………………………………………………………………………………………………………….74

4-8- پیشنهادات جهت تحقیقات آینده……………………………………………………………………………………………………….75

فهرست شکل ها

عنوان صفحه

شکل1-1-تصویر شماتیک ناحیه ی کد کننده ی ژنLTP2 گیاه برنج ایرانی………………………………………………………5

شکل1-2-بررسی توالی nsLTP1 و nsLTP2 در برخی از گیاهان……………………………………………………………….5

شکل1-3-الگوی تشکیل چهار نوع پیوند دی سولفیدی در دو نوع LTP موجود در گیاه برنج………………………………6

شکل1-4-توالی و ساختار LTP1………………………………………………………………………………………………………………8

شکل 1-5-توالی و ساختار LTP2…………………………………………………………………………………………………………….9

شکل1-6-نمای کلی از وجود ساختار های ثانویه ی آلفا هلیکس در ساختار LTP1 و LTP2……………………………..9

شکل 1-7-تطابق اسید آمینه ای آلرژن های LTP……………………………………………………………………………………….12

شکل1-8-برهمکنش ترکیبات مختلف از جمله کلسترول وانواع LTP ،………………………………………………………….16

شکل2-1-دیاگرام شماتیک نقشه ی ژنتیکی pET26b………………………………………………………………………………..22

شکل 2-2-دیاگرام شماتیک نقشه ی ژنتیکی pUC57…………………………………………………………………………………23

شکل2-3-توالی ژنی طراحی شده ی nsLTP2 برنج ایرانی…………………………………………………………………………..24

شکل2-4-اندازه نمایDNA…………………………………………………………………………………………………………………..35

شکل2-5-نمایی شماتیک از واکنش ترانسفورماسیون…………………………………………………………………………………..40

شکل3-1-نتایج استخراج ناقل با کیت استخراج پلازمید شرکت بیوبیسیک……………………………………………………….53

شکل3-2-نتایج هضم آنزیمی…………………………………………………………………………………………………………………..54

شکل3-3-بررسی کیفیت قطعات استخراج شده از ژل…………………………………………………………………………………..55

شکل 3-4-نتایج تهیه ی سلول های مستعد………………………………………………………………………………………………….56

شکل3-5-نتایج ترانسفورماسیون ناقل pET26b…………………………………………………………………………………………57

شکل 3-6-نتیجه ی کلونی- PCR ………………………………………………………………………………………………………..58

شکل 3-7-استخراج ناقل pET26b نوترکیب……………………………………………………………………………………………59

شکل3-8-بررسی هضم آنزیمی ناقل نوترکیب…………………………………………………………………………………………….60

شکل3-9-نتیجه ی توالی یابی جهش های F39A و L28A ……………………………………………………………………..61

شکل3-10-بخش های غشاء گذر و هیدروفوب پروتئین nsLTP2 با روش TMHMM………………………………….63

شکل3-11-نواحی هیدروفوب توالی پروتئینی nsLTP2 با روش Sliding Widow……………………………………….64

شکل 3-12-. میانگین میزان آنتی ژنیسیته ی آمینو اسید های توالی پروتئینی nsLTP2 در حالت طبیعی………….65

شکل3-13- میانگین میزان آنتی ژنیسیته ی آمینو اسید های توالی پروتئینی nsLTP2 در توالی جهش یافته………………….65

شکل3-14- ساختار شیمیایی LysoPC14 ……………………………………………………………………………………………..67

فهرست جدول ها

عنوان صفحه

جدول1-1- ساختار های LTP1 بررسی شده به وسیله ی NMR و کریستالوگرافی اشعه ی X……………………………7

جدول 2-1-تجهیزات و دستگاه های مورد استفاده……………………………………………………………………………………….19

جدول2-2- فهرست مواد مورد استفاده……………………………………………………………………………………………………..20

جدول 2-3- ترکیبات محیط کشت LB…………………………………………………………………………………………………….25

جدول2-4- مواد لازم برای ساخت محلول I استخراج ناقل……………………………………………………………………………27

جدول 2-5-مواد لازم برای ساخت محلول II استخراج ناقل…………………………………………………………………………..27

جدول 2-6-مواد لازم برای ساخت محلول III استخراج ناقل……………………………………………………………………….28

جدول 2-7-مواد لازم برای ساخت محلول TE…………………………………………………………………………………………..28

جدول 2-8-محتویات کیت استخراج ناقل بیوبیسیک……………………………………………………………………………………30

جدول 2-9 مواد لازم برای ساخت بافر TAE10X…………………………………………………………………………………….32

جدول2-10- مواد لازم برای ساخت بافر TBE10X…………………………………………………………………………………..33

جدول 2-11-ترکیب بافر بارگذاری 6X……………………………………………………………………………………………………36

جدول 2-12- مواد لازم جهت تهیه سلول مستعد………………………………………………………………………………………….37

جدول 2-13-غلظت آنتی بیوتیک برای انتخاب سویه ی مقاوم……………………………………………………………………….39

جدول 2-14-ترکیبات لازم برای واکنش هضم آنزیمی دوگانه ب برای ناقل pET26b…………………………………….41

جدول2-15-ترکیبات لازم برای واکنش هضم آنزیمی دوگانه برای ناقل pUC57 …………………………………………..41

جدول 2-16-محتویات کیت استخراج DNA از ژل بیونیر……………………………………………………………………………43

جدول 2-17-ترکیبات لازم برای واکنش اتصال با استفاده از ناقل pET26b……………………………………………………45

جدول2-18-مواد مورد نیاز برای PCR…………………………………………………………………………………………………….46

جدول 2-19-برنامه ی زمانی و دمایی واکنش کلنی PCR……………………………………………………………………………47

جدول2-20-نرم افزار ها و سرورهای مورد استفاده……………………………………………………………………………………….48

جدول 2-21-میزان هیدروفوبیسیته ی هر آمینو اسید……………………………………………………………………………………..49

جدول2-22-پارامتر های تنظیم شده در زمان Docking……………………………………………………………………………..51

جدول3-1- ویژگی های فیزیکو شیمیایی nsLTP2 برنج ایرانی…………………………………………………………………..62

جدول 3-2-موتیف ها و محل قرار گیری آن ها روی توالی nsLTP2 برنج ایرانی……………………………………………63

جدول 3-3-نواحی آنتی ژن توالی پروتئینی nsLTP2 برنج ایرانی………………………………………………………………..64

جدول 3-4-نواحی آنتی ژنیک موجود در توالی nsLTP2 برنج ایرانی که با MHC-II واکنش می دهد……………66

…. 15

2-2-5-3- اثر دما بر واكنش های بیوشیمیایی……………………………………………………………… 16

2-3- زنبورهای پارازیتوئید بالا خانواده Bethyloidea………………………………………………… 17

2-4- خانواده Bethylidae …………………………………………………………………………………. 17

2-4-1- مرفولوژی خانواده Bethylidae ……………………………………………………………….. 17

فصل سوم : مواد وروشها

3-1- جمع آوری و شناساییGoniozusspp.………………………………………………………… 20

3-2- پرورش آزمایشگاهی پارازیتوئیدGoniozusspp.و کرم میوه خوار خرما……………….. 21

3-2-1- پرورش کرم میوه خوار خرما……………………………………………………………………….. 21

3-2-2- پرورش زنبور پارازیتوئید……………………………………………………………………………. 22

3-3- بررسی زیست شناسی زنبورهای پارازیتوئید………………………………………………………… 24

3-3-1- طول عمر زنبورهای نر و ماده و طول دوره باروری ………………………………………….. 24

3-4- بررسی الگوی تخمگذاری زنبورهای پارازیتوئید……………………………………………………. 26

3-5- بررسی رابطه وزن میزبان و تعداد تخم گذاشته شده………………………………………………. 26

3-6-تجزیه وتحلیل داده ها…………………………………………………………………………………….. 26

فصل چهارم : نتایج

4-1- جمع آوری و شناسایی زنبورهای پارازیتوئید کرم میوه خوار خرما…………………………….. 27

4-2- شكل شناسی زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. (تخم، لارو، شفیره و حشره بالغ)……. 28

4-3- زیست شناسی زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp.…………………………………………….32

4-3-1- طول دوره زندگی (تخم، لارو، شفیره و حشره بالغ)………………………………………….. 34

4-3-2- رفتار تخم گذاری…………………………………………………………………………………….. 36

4-3-3- طول عمر زنبورهای نر و ماده………………………………………………………………………. 38

4-3-4- بررسی نسبت جنسی زنبورهای نر و ماده بر روی مراحل مختلف رشدی کرم میوه خوار خرما 38

4-4- تعیین الگوی تخمگذاری زنبورهای پارازیتوئید…………………………………………………….. 39

4-5- بررسی رابطه وزن میزبان و تعداد تخم گذاشته شده………………………………………………. 42

فصل پنجم: بحث

پیوست ها……………………………………………………………………………………………………………. 59

فهرست منابع……………………………………………………………………………………………………….. 62

Abstract ………………………………………………………………………………………………………… 65

فهرست جداول

جدول شماره4-1- زیست شناسی زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. بر روی کرم میوه خوار خرما

در شرایط آزمایشگاهی، دما 1±28 درجه سانتی گراد، رطوبت نسبی 5±60 درصد، 14ساعت روشنایی

و10 ساعت تاریکی……………………………………………………………………………………………… 36

جدول شماره 4-2- الگوی تخمگذاری در شرایط آزمایشگاهی 2±26 درجه سانتی گراد، رطوبت

نسبی60-70 درصد و 14 ساعت روشنایی و 10 ساعت تاریکی…………………………………….. 39

جدول شماره 4-3-تجزیه واریانس پراکنش تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی

سطوح لاروی کرم میوه خوار خرما بدون در نظر گرفتن قفسه سینه و شکم ………………………………………………………………………………………………………………………… 40

جدول شماره 4-4- تجزیه واریانس بین گروه ها و داخل گروه ها 41

جدول شماره4-5- جدول فراوانی تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی سطوح لاروی

کرم میوه خوار خرما …………………………………………………………………………. 41

جدول شماره4-6- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئید spp.Goniozus

روی سطوح لاروی کرم میوه خوار خرما. ………………………………………. 42

جدول شماره 4-7- جدول تجزیه واریانس تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی

بندهای لارو کرم میوه خوار خرما…………………………………………………. 42

جدول شماره 4-8- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGomiozusspp. روی قفسه سینه و شکم لارو کرم میوه خوار خرما ……………………………………………………………………………………………………………… 43

جدول شماره 4-9- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGomiozusspp.

در نواحی مختلف بدن لارو کرم میوه خوار خرما………………….. 43

جدول شماره4-10- جدول تجزیه واریانس تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی

بندهای شکم و قفسه سینه لارو کرم میوه خوار خرما………… 44

جدول شماره 4-11- جدول گروه بندی میانگین تعداد تخم زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp.

روی نواحی مختلف بدن لارو کرم میوه خوار خرما (بر اساس قانون دانکن) ………………………………………………………………………………………………………………………… 45

جدول شماره 4-12- تعداد تخم گذاشته شده توسط زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp. روی لارو

کرم میوه خوار خرما………………………….. 47

فهرست نمودار

نمودار شماره 4-1- نمودار تجمعی نتایج پیش بینی شده و نتایج مشاهدات…………………………. 47

فهرست اشكال

عکس2-1- مورفولوژی زنبورهای خانواده Bethyloidea ……………………………………………. 19

عکس3- 1- انكوباتور حاوی ظروف پرورش زنبورهای پارازیتوئید…………………………………… 22

عکس3-2- اتاق پرورش بخش تحقیقات حشره شناسی كشاورزی…………………………………… 23

عکس3-3- ظروف بررسی رفتار زنبورهای پارازیتوئید در اتاق پرورش……………………………… 23

عکس 3-4- پتری دیشهای بررسی نسبت جنسی زنبورهای پارازیتوئید………………………………. 25

عکس3-5- ظروف بررسی الگوی تخمگذاری……………………………………………………………… 26

عکس4 -1- رگبندی بال جلویی درGoniozusspp…………………………………………………. 27

عکس4 -2- تخم بیضی شکل، موازی محور طولی بدن………………………………………………….. 28

عکس 4-3- تخمگذاری به صورت دسته جمعی………………………………………………………….. 29

عکس 4-4- مراحل اولیه لاروی………………………………………………………………………………. 29

عکس 4-5- مرحله انتهای لاروی…………………………………………………………………………….. 30

عکس 4-6- سوراخ دایره ای شکل، محل خروج حشره کامل از پیله ابریشمی سفید…………….. 31

عکس 4-7- حشره بالغ زنبور پارازیتوئیدGoniozusspp………………………………………….. 32

عکس 4-8- سطح شکمی شفیره بدون پیله…………………………………………………………………. 33

عکس 4-9- سطح پشتی شفیره بدون پیله…………………………………………………………………… 34

عکس4-10- حشره بالغ زنبور پارازیتوئید (نر)…………………………………………………………….. 35

2-1-9 )بانک مرکزی ایران. 15

2-1-10) نظام بانکی بعد از انقلاب اسلامی ایران. 15

2-1-11 )سیر تحول فناوری اطلاعات در صنعت بانکداری. 16

2-1-11-1) دوره اول: اتوماسیون پشت باجه : 16

2-1-11-2) دوره دوم: 16

2-1-11-3 )دوره سوم : 16

2-1-11-4 دوره چهارم: 17

2-1-12) نقش فناوری اطلاعات در بانکداری الکترونیک: 18

2-1-13) مزایای بانکداری الکترونیک… 18

2-1-14 )یک فرصت ، یک تهدید 19

2-1-15 )در ایران. 19

2-1-16) تعریف بانکداری الکترونیک: 20

2-1-17)برخی از عوامل تاثیر گذار در توسعه بانکداری الکترونیک: 20

2-1-18 )ضرورت بکارگیری فناوری اطلاعات در ارائه خدمات بانکی: 21

2-1-19) عملیات بانکداری الکترونیک درسیستم بانکی کشور. 24

2-1-20) درگاه ها و محصولات بانکداری الکترونیک : 25

2-1-20-1) ترمینالها و تجهیزات بانکداری الکترونیک… 26

2-1-20-2 ) کارت بانکی : 27

2-1-20-3 )سامانه های بانکداری مجازی: 29

2-1-21 )مزایای همراه بانک… 32

2-1-22 )دیگر فواید بانکداری همراه 33

2-1-23 )مزایای بانکداری همراه از دیدگاه بانک ها 34

2-1-23-1)تشدید رقابت در بانک ها 34

2-1-23-2 )گروه هدف.. 34

2-1-24 )تاریخچه بانکداری همراه 35

بخش دوم : 36

بازاریابی خدمات و پذیرش مشتری. 36

2-2 بخش دوم : بازاریابی خدمات و پذیرش مشتری. 37

2-2-1 )بازاریابی. 37

2-2-2) انواع بازاریابی. 37

2-2-3 )مدیریت بازاریابیخدمات.. 37

.. 37

2-2-5) مشتری. 38

2-2-6 )عواملی که برای مشتری اهمیت دارد. 38

2-2-7) خط مشی پذیرش مشتری. 39

2-2-8) شناسایی هویت مشتری. 39

2-2-9) الزامات کلی برای شناسایی هویت مشتریان. 41

2-2-10) مدل های پذیرش و به کارگیری فناوری اطلاعات.. 41

بخش سوم : 45

2-3 )بخش سوم :بانک صادرات.. 46

2-3-1 )تاریخچه 46

2-3-2) سرمایه اولیه بانك. 46

2-3-3 )شروع كار اولین شعبه 46

2-3-4 )عملکرد بانک در اولین سالها 47

2-3-5 )خصوصی شدن دوباره بانک… 47

2-3-6) بانکداری همراه در بانک صادرات.. 48

2-3-7 )معرفی خدمات بانک… 48

2-3-8 )خدمات ارائه شده از طریق همراه بانک صادرات.. 48

. 48

2-4-1 تحقیقات داخلی. 48

2-4-2 )تحقیقات خارجی. 52

3-1) مقدمه 57

3-2 )روش پژوهش.. 57

3-3 )جامعه آماری. 57

3-4 )نمونه آماری و روش نمونه گیری. 57

3-5 )ابزار گردآوری داده ها 58

3-6 )روایی و پایایی ابزار اندازه گیری. 58

3-7 )تفکیک سوالات پرسشنامه بر مبنای فرضیات.. 60

3-8 )روش تجزیه و تحلیل داده ها 60

4-1 )مقدمه 62

4-2 )یافته های تحقیق. 62

4-2-1 ) تحلیل های آماری توصیفی. 62

4-2-1-1) جنسیت.. 63

4-2-1-2 ) میزان تحصیلات.. 63

4-2-1-3 سن. 64

4-2-2 )توزیع توصیفی متغیرها 66

4-3 )آمار استنباطی و آزمون فرضیه ها 67

4-4 بررسی نرمال بودن داده ها با استفاده از آزمون کولمو گروف – اسمیرنوف.. 67

4-5 )آزمون فرضیات: 68

4-5-1) آزمون همبستگی : 68

4-5-2) رگرسیون. 72

4-5-3 )آزمون رتبه بندی فریدمن. 76

5-1) مقدمه 79

5-2 )بیان اهداف تحقیق. 79

5-3 )یافته های حاصل از توصیف داده ها 79

5-4 )یافته های حاصل از سوالات پژوهش.. 79

5-5) ارائه مدل مفهومی. 82

5-5) بحث و نتیجه گیری. 84

5-5-1) پیشنهادات مبتنی بر نتایج. 84

5-5-2 )محدودیت های تحقیق. 85

5-5-3) محدودیت های خارج از کنترل. 86

5-5-4 )پیشنهاد برای پژوهش های آتی. 86

منابع و مأخذ 100

پیوستها و ضمائم 87

فهرست جداول

جدول 2-1 میانگین هزینه برای بانک ها به ازای هر مشتری. 24

جدول 3-1 آلفای کرونباخ سوالات پرسشنامه 59

جدول 4-1 توزیع فراوانی جنسیت پاسخ دهندگان. 63

جدول 4-2 توزیع فراوانی سطح تحصیلات پاسخ دهندگان. 64

جدول 4-3 توزیع فراوانی بر اساس سن پاسخ دهندگان. 64

جدول 4-4 توزیع فراوانی تبلیغات همراه بانک… 66

جدول 4-5 شاخص های توصیفی متغیرهای تحقیق. 66

جدول 4-7 نتیجه آزمون همبستگی رابطه اعتماد و پذیرش همراه بانک… 69

جدول 4-8 نتیجه آزمون همبستگی رابطه شرایط تسهیل کننده و پذیرش همراه 69

جدول 4-9 نتیجه آزمون همبستگی رابطه کارایی مورد انتظار مشتری و پذیرش همراه بانک………..90

جدول 4-10 نتیجه آزمون همبستگی رابطه تبلیغات و اعتماد مشتری. 71

جدول 4-11 نتیجه آزمون همبستگی رابطه تبلیغات و کارایی مورد انتظار مشتری. 71

جدول 4-12 نتایج رگرسیون فرضیه اول. 73

جدول 4-13 نتایج رگرسیون فرضیه دوم 73

جدول 4-14 نتایج رگرسیون فرضیه سوم 74

جدول 4-15 نتایج رگرسیون فرضیه چهارم 75

جدول 4-16 نتایج رگرسیون فرضیه پنجم 75

جدول 4-17 آزمون فریدمن. 76

جدول 4-20 آزمون آماری فریدمن تبلیغات.. 77

جدول 4-18 آزمون آماری- نتیجه آزمون فریدمن. 76

جدول 4-19 آزمون فریدمن تبلیغات.. 77

جدول 5-2 فراوانی اهمیت امنیت حریم خصوصی. 85

جدول 5-1 توزیع فراوانی عملکرد بانک در تبلیغات همراه بانک… 82

………………………………………………………………………………………………………………………………40

2-5-1 ساختمان عمومی لوله گوارش ………………………………………………………………………………………………………………….40

2-5-2 وضع تشریحی روده باریک ……………………………………………………………………………………………………………………..42

2-6 فراسنجه های خونی ……………………………………………………………………………………………………………………………………44

2-6-1 پروتئین­های پلاسما …………………………………………………………………………………………………………………………………45

2-6-2 اهمیت غلظت پروتئین پلاسما در تعیین چگونگی توزیع مایعات بین خون و بافت …………………………………………..45

2-6-3 مطالعات در مورد پروتئین های پلاسما ………………………………………………………………………………………………………46

2-6-4 آلبومین پروتئین اصلی موجود در پلاسما ……………………………………………………………………………………………………48

2-6-5 نقش ایمنوگلوبولینهای پلاسما در مکانیسم­های دفاعی بدن …………………………………………………………………………..49

2-6-6 انتقال وذخیره سازی لیپیدها ……………………………………………………………………………………………………………………..50

2-6-7 چهار گروه اصلی لیپوپروتئین­های پلاسما …………………………………………………………………………………………………..51

فصل سوم …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………53

مواد و روشها …………………………………………………………………………………………………………………………………………………….53

3-1 محل وزمان آزمایش ……………………………………………………………………………………………………………………………………54

3-2 آماده سازی سالن ………………………………………………………………………………………………………………………………………..54

3-3 جوجه­ریزی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………….54

3-4 مشخصات جیره ها ……………………………………………………………………………………………………………………………………..55

3-5 پرورش جوجه ها ……………………………………………………………………………………………………………………………………….56

3-6 آزمایشات ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….56

3-6-1 مصرف خوراک ………………………………………………………………………………………………………………………………………56

3-6-2 افزایش وزن هفتگی ………………………………………………………………………………………………………………………………..57

3-6-3 ضریب تبدیل غذایی ……………………………………………………………………………………………………………………………….57

3-6-4 وزن نهایی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..58

3-6-5 فراسنجه های خون …………………………………………………………………………………………………………………………………58

3-6-6 مورفولوژی روده …………………………………………………………………………………………………………………………………….59

3-7 آنالیز داده های آماری ………………………………………………………………………………………………………………………………….59

فصل چهارم :نتایج ……………………………………………………………………………………………………………………………………………60

4-1 اثر جیره های آزمایشی بر عملکرد ………………………………………………………………………………………………………………..61

4-1-1 ضریب تبدیل غذایی ……………………………………………………………………………………………………………………………….61

4-1-2 مصرف خوراک ………………………………………………………………………………………………………………………………………62

4-1-3 میانگین افزایش وزن ……………………………………………………………………………………………………………………………….63

4-2 اثر تیمارهای آزمایشی بر مورفولوژی روده …………………………………………………………………………………………………….64

4-3 اثر تیمارهای آزمایشی بر چربی و پروتئین سرم ……………………………………………………………………………………………… 65

فصل پنجم :بحث ………………………………………………………………………………………………………………………………………………66

5-1 اثر جیره های آزمایشی بر عملکرد جوجه های گوشتی………………………………………………………………………………………67

5-2 اثر تیمارهای آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک …………………………………………………………………………………………72

5-3 اثر تیمارهای آزمایشی بر چربی و پروتئین سرم ……………………………………………………………………………………………….76

6- نتیجه گیری …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..78

7- پیشنهادات ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………79

جداول ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..80

منابع ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………100

فهرست جداول

1: ترکیب شیمیایی جیره های آزمایشی…………………………………………………………………………………………………………………..81

2: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر ضریب تبدیل غذایی………………………………………………………………………………………….82

3: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی برمصرف خوراک………………………………………………………………………………………………….83

4: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر افزایش وزن ………………………….. …………………………………………………………………..84

5: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ددنوم) در 42 روزگی…………………………………………………..85

6: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ددنوم) در 49 روزگی…………………………………………………..86

7: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ژژنوم) در 42 روزگی …………………………………………………87

8 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ژژنوم) در 49 روزگی…………………………………………………88

9 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ایلئوم) در 42 روزگی ……………………………………………….89

10 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ایلئوم) در 49 روزگی ……………………………………………..90

11 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (قائده سکوم) در 42 روزگی …………………………………….91

12 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (قائده سکوم) در 49 روزگی …………………………………….92

13. اثر تیمارهای ازمایشی بر مورفولوژی (بدنه سکوم) جوجه های گوشتی در 42 روزگی …………………………………………93

13. اثر تیمارهای ازمایشی بر مورفولوژی (بدنه سکوم) جوجه های گوشتی در49 روزگی …………………………………………..94

3-3- محلول سازی: 25

3-3-1- آماده سازی محیط کشت: 25

3-3-2- محیط شکلات اگار: 26

3-3-3- آماده سازی ژل اگارز 1 درصد: 27

3-4- طراحی و روش اجرا: 27

3-4-1- جمع‏آوری نمونه: 27

3-5- کشت نمونه ها: 27

3-6- تست های بیوشیمیایی: 28

3-7- رنگ آمیزی: 29

3-8- نگهداری ایزوله های بالینی هموفیلوس آنفلوانزا در شرایط کرایو در دمای -80ْ: 29

3-9- استخراج DNA.. 30

3-9-1-استخراج DNA به روش جوشاندن: 30

3-10- بررسی کیفیت و کمیت DNAاستخراج شده: 30

3-11- راه اندازی و انجام PCR: 31

3-12- واکنشPCR.. 32

3-13- الکتروفورز محصول PCR: 35

3-13-1- مواد و وسایل مورد نیاز: 35

3-13-2- نحوه تهیه ژل اگارز و انجام الکتروفورز: 35

3-14- تفسیر ژل الکتروفورز. 36

3-15- RFLP.. 36

3-15-1- استخراج باند اصلی از روی ژل اگارز. 37

3-15-2- بررسی غلظت محصولات تخلیص شده توسط دستگاه نانودراپ: 37

3-16- مواد و وسایل لازم برای RFLP: 37

3-16-1- روش انجام RFLP باآنزیمAlu1: 38

3-16-2- انجامRFLP باآنزیم محدودالاثر EcoR1: 38

3-17- تعیین توالی و پردازش داده ها: 38

3-17-1- ارسال نمونه‏ها جهت توالی یابی قطعه تکثیر شده: 39

فصل چهارم: تجزیه و تحلیل داده ها 40

4-1- تعداد نمونه‏ها و ایزولاسیون: 41

4-2-تستهای بیوشیمیایی: 42

4-3-نتایج بررسی کمیت و کیفیت DNA استخراج شده: 42

4-4- PCRژن ompP2 ایزوله های بالینی هموفیلوس آنفلوانزا: 43

4-5- RFLP: 44

4-6: نتایج تعیین توالی (Sequencing) و ثبت توالی ها دردیتابیسGeneBank/EMBL: 45

4-7- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی نمونه ها: 46

4-7-1- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 3: 46

4-7-2. آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 5: 47

4-7-3- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 8: 48

4-7-4- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 35: 49

4-7-5- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 47: 50

4-7-5- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره14: 51

4-8- بررسی میزان شباهت و تفاوت ایزوله های بالینی تهران: 52

فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری.. 56

5-1- آنالیز RFLP از ایزوله های بالینی: 57

5-2. آنالیز و بررسی جهش های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 3: 57

5-2-1آنالیز و بررسی جهش های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 5: 58

5-2-2- آنالیز و بررسی جهش های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 8: 58

5-2-3- آنالیز و بررسی جهش های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 35: 59

5-2-4- آنالیز و بررسی جهش های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 14: 60

5-2-5- آنالیز و بررسی جهش های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 47: 60

5-3- بحث: 61

پیشنهادات: 66

منابع. 67

فهرست منابع. 68

Abstract 75

پیوست ها 76

فهرست جداول

جدول3-1- مواد تشکیل دهنده و مقدار حجم آنها برای PCRاز ompP2. 34

جدول 3-2- برنامه PCR برای تکثیر ژن ompP2. 34

جدول3-3- توالی پرایمرهای مورد استفاده برای ompP2. 35

جدول 4-1- اطلاعات نمونه های دریافتی از بیماران مورد مطالعه. 41

جدول 4-2 نتایج بررسی کمیت و کیفیت DNA استخراج شده 42

جدول 4-3- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 3 در NCBI 47

جدول 4-4- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 5 در NCBI 48

جدول 4-5- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 8 در NCBI 49

جدول 4-6- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 35 در NCBI 50

جدول 4-7- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 47 در NCBI 51

جدول 4-8-. نتیجهBlast سکانس اسید نوکئیک شماره 14 در NCBI 52

فهرست اشکال

شکل1-1- ساختارشیمیایی پلی ریبوزیل ریبیتول فسفا ت… 3

شکل1-3- کلو نی های هموفیلو س آنفولانزا روی محیط شکلات اگار. 5

شکل3-1-تست کاتالاز. 29

شکل 3-2- شکل باسیل گرم منفی هموفیلوس آنفلوانزا 30

شکل 3-3- دستگاه ترموسایکلر. 34

شکل 3-4- دستگاه الکتروفورز. 36

شکل4-1- ژن ompP2 ایزوله های با لینی… 43

شکل 4-2و4-3- جایگاه برش آنزیم محدودالاثر Alu1برای ژنompP2 ایزوله های بالینی… 44

شکل 4-4- جایگاه برش آنزیم محدودالاثر ECOR1برای ژن ompP2ایزوله های بالینی… 44

شکل 4-5- کروماتوگرام به دست آمده از تعیین توالی ژن ompP2 نمونه شماره 14با پرایمر Forward.. 45

شکل 4-6- کروماتوگرام به دست آمده از تعیین توالی ژن ompP2نمونه شماره 14با پرایمر Revers. 45

شکل 4-7- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 3 با اطلاعات ثبت شده در Gene Bank و بررسی توالی اسیدآمینه آنها 46

شکل 4-8- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 3.. 46

شکل 4-9- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 5 با اطلاعات ثبت شده در Gene Bank و بررسی توالی اسیدآمینه آنها 47

شکل 4-10- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 5.. 47

شکل 4-11- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 8 با اطلاعات ثبت شده در Gene Bank و بررسی توالی اسیدآمینه آنها 48

شکل 4-12- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 8.. 48

شکل 4-13- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 35 با اطلاعات ثبت شده در Gene Bankو بررسی توالی اسیدآمینه آنها 49

شکل 4-14- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 35.. 49

شکل 4-15- آنالیزو مقایسه نمونه شماره 47با اطلاعات ثبت شده در Gene Bankو بررسی توالی اسیدآمینه آنها 50

شکل 4-16- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 47.. 50