2-3- اندوفیت و کلونیزاسیون ………………………………………………………………………………… 18

2-4- باکتری­های اندوفتیک و کاربرد آن­ها……………………………………………………………………. 21

2-4-1- افزایش تولید هورمون­های گیاهی……………………………………………………………………. 21

2-4-2- تثبیت بیولوژیکی نیتروژن……………………………………………………………………………… 25

2-4-3- فیتوبیورمیدیشن………………………………………………………………………………………….. 28

2-4-4- انحلال فسفات…………………………………………………………………………………………… 39

2-4-5- تولید سیدروفور……………………………………………………………………………………………. 41

2-4-6- تولید آنتی­بیوتیک و آنتی­بیوزیس………………………………………………………………………. 44

2-5- باکتری­های اندوفتیک و تولید آنزیم……………………………………………………………………….. 51

2-6- تنوع و جمعیت میکروارگانیسم­های یافت شده به­عنوان اندوفتیک………………………………….. 53

فصل سوم (مواد و روش­ها)

3-1- جداسازی و کشت باکتری اندوفتیک………………………………………………………………………. 59

3-1-1- مواد و وسایل لازم جهت جداسازی و کشت باکتری­های اندوفتیک از گیاه­گندم……………. 59

3-1-2- روش کار……………………………………………………………………………………………………. 59

3-1-2-1- نمونه و نمونه­گیری…………………………………………………………………………………….. 59

3-1-2-2- کشت و شناسایی………………………………………………………………………………………. 60

3-2-شناسایی فنوتیپی باکتری­های اندوفتیک…………………………………………………………………….. 60

3-2-1-رنگ­آمیزی گرم…………………………………………………………………………………………….. 60

3-2-2- تست کاتالاز……………………………………………………………………………………………….. 61

3-2-3- تست سیتوکروم­اکسیداز………………………………………………………………………………….. 61

3-2-4- تست کوآگولاز…………………………………………………………………………………………….. 61

3-2-5- تست حرکت………………………………………………………………………………………………. 62

3-2-6- تست هیدرولیز­ژلاتین…………………………………………………………………………………….. 62

3-2-7- تست سیمون­سیترات……………………………………………………………………………………… 63

3-2-8- تستMR/VP………………………………………………………………………………………………….63

3-2-9- تست هیدرولیز­نشاسته……………………………………………………………………………………. 63

3-2-10- تست هیدرولیز­کازئین………………………………………………………………………………….. 64

3-3- شناسایی باکتری­های تولید­کننده ترکیبات ضد­قارچی به روش مولکولار…………………………… 64

3-3-1- مواد و وسایل مورد استفاده جهت استخراجDNA…………………………………………………64

3-3-2- روش استخراجDNAژنومی…………………………………………………………………………… 65

3-3-3- روش تهیه ژل آگارز یک درصد……………………………………………………………………….. 65

3-3-4- انجامPCR………………………………………………………………………………………………………….. 66

3-3-4-1- وسایل مورد استفاده برای انجام PCR و شرایط دمایی دستگاه ترموسایکلر……………… 66

فصل چهارم (نتایج و بحث)

4-1- جداسازی باکتری­های اندوفتیک از گیاه­گندم…………………………………………………………….. 67

4-2- شناسایی فنوتیپی باکتری­های اندوفتیک 68

4-3- ارزیابی اثر آنتاگونیسمی باکتری­های اندوفتیک برعلیه قارچ­های بیوکنترلی و قارچ­های پاتوژن
گیاهی……………………………………………………………………………………………………………………. 70

4-4- بررسی فعالیت آنزیمβ-1و4­گلوکاناز……………………………………………………………………. 76

4-4-1- مواد و وسایل لازم………………………………………………………………………………………… 76

4-4-2- روش تهیه محلول نمکی 1­مولار………………………………………………………………………. 76

4-4-3- ترکیبات محیطCMCآگار1%…………………………………………………………………………… 77

4-4-4 معرف آزمایش کنگورد…………………………………………………………………………………….. 77

4-4-5 کشت و بررسی……………………………………………………………………………………………… 77

4-5- نتایج مربوط به شناسایی مولکولی باکتری­ها……………………………………………………………… 77

4-5-1- آنالیز کیفی محصولاتPCR……………………………………………………………………………78

4-5-2- نتایج تعیین توالی………………………………………………………………………………………….. 78

فصل پنجم (نتیجه­ گیری)

5-1. نتیجه گیری……………………………………………………………………………………………………… 92

5-2پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………. 98

منابع و ماخذ……………………………………………………………………………………………………………. 99

چکیده انگلیسی…………………………………………………………………………………………………………. 109

فهرست جداول

عنوان جدول صفحه
جدول2-1. مشخصه­هایی از بیماری زنگ…………………………………………………………………………………………5
جدول2-2. مشخصه­هایی از بیماری سیاهک……………………………………………………………………………………..6
جدول2-3. انواع میکوتوکسین فوزاریومی……………………………………………………………………………………….12
جدول2-4. انواع ترشحات ریشه……………………………………………………………………………………………………18
جدول2-5. اندوفیتیک­های تثبیت­کننده نیتروژن………………………………………………………………………………..28
جدول2-6. میکروارگانیسم­های مولد اسید­آلی………………………………………………………………………………….32
جدول2-7. میکروارگانیسم­های مولد بیوسورفاکتانت………………………………………………………………………..33
جدول2-8. میکروارگانیسم­های مولد گلیکوپروتئین………………………………………………………………………….34
جدول2-9. میکروارگانیسم­های اکسید­کننده و احیاء­کننده…………………………………………………………………..35
جدول2-10. میکروارگانیسم­های دخیل در فیتوبیورمیدیشن……………………………………………………………….39
جدول2-11. میکروارگانیسم­های مولد سیدروفور…………………………………………………………………………….43
جدول2-12. اندوفیت­های مولد آنتی­بیوتیک و عملکرد آن­ها……………………………………………………………..50
جدول3-1. شرایطPCR……………………………………………………………………………………………………………….66
جدول3-2. چرخهPCR………………………………………………………………………………………………………………..66
جدول3-3. توالی پرایمرطراحی شده برای16S rRNA………………………………………………………………………66
جدول4-1. نتایج آزمون­های بیوشیمیایی…………………………………………………………………………………………68
جدول4-2. اسامی قارچ­های مورد آزمون………………………………………………………………………………………..71
جدول4-3. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهFusarium moniliforme………………………………………………………..72
جدول4-4. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهFusarium graminearum……………………………………………………..72
جدول4-5. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهFusarium oxysporum…………………………………………………………..72
جدول4-6. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهFusarium culmorum…………………………………………………………..72
جدول4-7. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهTricoderma virida………………………………………………………………73
جدول4-8. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهTricoderma harizanum……………………………………………………….73
جدول4-9. نتایج آنتاگونیسمی برعلیه.Tricoderma asperellum………………………………………………………73
جدول4-10. نتایج آنتاگونیسمی برعلیهMacrophomina phaseolina………………………………………………73
جدول4-11. ترکیبات محیطCMCآگار1%……………………………………………………………………………………..76
جدول4-12. نتایجBlast……………………………………………………………………………………………………………..79

فهرست شکل­ها

پایان نامه

ی نوشته‌ها


 
 
 
موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...