دانلود پایان نامه: آنالیز بیان چندین ژن مهم در مسیر Signal transductionو پارامترهای فیزیولوژیک مرتبط با آن در پاسخ … |
1-1-2 کلزا و اهمیت اقتصادی آن……………………………………………………………………
5
1-2 تنش خشکی………………………………………………………………………………..
8
1-2-1 مکانیسمهای مقاومت به خشکی در گیاهان زراعی……………………………………………….
11
1-2-2 اثر تنش خشکی بر روی کلزا…………………………………………………………………
12
1-2-3- ﺗﺄثیر تنش خشکی بر رشد و فتوسنتز………………………………………………………
14
1-2-4 اثر تنش خشکی روی آنزیمهای آنتیاکسیدانت و مالوندیآلدهید………………………………
18
1-2-5 ﺗﺄثیرتنش خشکی بر میزان نیترات و نیترات ردوکتاز…………………………………………….
19
1-2-6 ﺗﺄثیر تنش خشکی بر القای اسمولیتهای سازگار………………………………………………
21
1-3 کلیاتی در زمینه مسیر درک علامت (Singal transduction) در گیاهان…………………………….
21
1-3-1 اثر تنشهای محیطی در فرایندهای مولکولی در گیاهان………………………………………………………….
23
1-3-2 مسیرهای ژنهای کنترل کننده تنشهای غیرزنده………………………………………………………………………
24
1-4 ژنهای مورد مطالعه…………………………………………………………………………………………………………..
24
1-4-1 پروتئین کینازها………………………………………………………………………………………………………………
26
1-4-2 خانواده ژنیMAPK……………………………………………………………………………………………………..
28
1-4-3 ژن حساس به اکسین………………………………………………………………………………….
33
فصل دوم: مواد و روشها………………………………………………………………………
34
2-1 شرایط رشد………………………………………………………………………………………………………………….
34
2-1-1 نحوه تیماردهی گیاهان…………………………………………………………………………………………………
35
2-1-2 برداشت نمونه……………………………………………………………………………………………………………
35
2-1-2-1 برداشت نمونه جهت انجام بررسیهای مولکولی……………………………………………..
35
2-1-2-2 برداشت نمونه جهت انجام بررسیهای فیزیولوژیک………………………………………………………………
36
2-2 روش های بکار گرفته شده در آزمایشات مولکولی………………………………………………………………………..
36
2-2-1 پودر کردن و آماده سازی نمونه جهت استخراج RNA ………………………………………………………….
36
2-2-2 استخراج RNA از بافت گیاهی……………………………………………………………………………………………………
36
2-2-3 اندازهگیری میزان غلظت RNA و رقیق سازی نمونهها…………………………………………………………………..
37
2-2-4- روش تهیه cDNA………………………………………………………………………………………………
37
2-2-5- واکنش RT-PCR………………………………………………………………………………………………
38
2-2-6 تهیه ژل الکتروفورز……………………………………………………………………………………………………………………..
38
2-2-6-1 تهیه TBE 5X…………………………………………………………………………………………………
38
2-2-7 پرایمرهای استفاده شده در این پژوهش………………………………………………………………………………………….
38
2-3 روشهای بکار گرفته شده در آزمایشات فیزیولوژیکی……………………………………………………………………………
38
2-3-1 طرز تهیه عصاره گیاهی جهت تعیین میزان فعالیت آنزیمهای آسکوربات و گایاکول پراکسیداز…………………….
39
2-3-1-1 اندازهگیری فعالیت آنزیم آسكوربات پراكسیداز(APX)………………………………………………………
39
2-3-1-2 اندازهگیری فعالیت آنزیم گایاكول پراكسیداز(GPX)………………………………………………………..
39
2-3-2 سنجش فعالیت آنزیم کاتالاز………………………………………………………………………………………………………………..
40
2-3-3 اندازهگیری میزان پراکسیداسیون چربیها (MDA)……………………………………………………………………………….
40
2-3-4 اندازهگیری پروتئین کل…………………………………………………………………………………………………………….
41
2-3-5 اندازهگیری قندهای محلول………………………………………………………………………………………………………………….
41
2-4 آنالیزهای آماری…………………………………………………………………………………………………………………………..
42
فصل سوم: نتایج………………………………………………………………………………………………………………………………….
43
3-1 نتایج حاصل از بررسیهای انجام یافته در سطح مولکولی…………………………………………………………………………….
43
3-1-1 بررسی بیان ژنProtein Kinaseتحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا(B.napus)………………………….
45
3-1-2 بررسی بیان ژنMAPK4تحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا(B.napus)…………………………………….
46
3-1-3 بررسی بیان ژنMAPK3تحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا(B.napus)…………………………………….
48
3-1-4 بررسی بیان ژنAuxin responsive proteinتحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا(B.napus)……………
49
3-2 بررسی نتایج حاصل از آزمایشات فیزیولوژیکی…………………………………………………………………………………………….
49
3-2-1 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان فعالیت آنزیم گایاکول پراکسیداز (GPX) درگیاه کلزا………………………………
50
3-2-2 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان فعالیت آنزیم آسکوربات پراکسیداز (APX) درگیاه کلزا……………………………..
52
3-2-3 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان فعالیت آنزیم کاتالاز (CAT) درگیاه کلزا……………………………………………..
53
3-2-4 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان مالوندیآلدهید (MDA) درگیاه کلزا…………………………………………………
55
3-2-5 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان پروتئین کل درگیاه کلزا…………………………………………………………………………..
55
3-2-6 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان قندهای محلول درگیاه کلزا………………………………………………………………………
57
فصل چهارم: بحث و بررسی…………………………………………………………………………………………………………………………….
58
4-1- بررسی های انجام شده در سطح مولکولی……………………………………………………………………………………………………
61
4-2 بررسیهای انجام شده در سطح فیزیولوژیکی……………………………………………………………………………………………….
66
4-3 نتیجهگیری کلی………………………………………………………………………………………………………………………………………..
67
4-4 پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………………………………….
68
5- ضمائم…………………………………………………………………………………………………………………………………………..
فرم در حال بارگذاری ...
[چهارشنبه 1399-10-17] [ 01:00:00 ق.ظ ]
|