1-6-5-1-1- دوره تعلیق نهضت فمینیسم 12-9

1-6-5-2- موج دوم 13-12

1-6-5-2-1- تأثیر جنگ جهانی دوم بر موج دوم 14-13

1-6-5-2-2- دولت مداخله گر 16-14

1-6-5-3- شکل گیری موج سوم 16

1-6-5-3-1- موج سوم 18-16

1-6-6- شاخه آکادمیک جنبش زنان 19-18

1-6-7- مکتب های مهم فمینیسم 20-19

1-7- برخی دستاوردهای جنبش زنان 21-20

فصل 2- تاریخچهمطالعات زناندرباستان شناسیجهان 22

2-1- مقدمه 22

2-2- مطالعات فمینیسم و زنان در علوم انسانی 23

2-2-1- مروری بر امواج سه گانه فمینیسم و تأثیر آن در باستان-

شناسی 25-24

2-2-2- گرایش های فمینیستی .26-25

2-3- مطالعات فمینیسم در باستان شناسی 27-26

2-4- پیشینه مطالعات جنسیت در باستان شناسی 28

2-4-1- فمینیسم و باستان شناسی جنسیت …..28

2-4-2- زمینه های شکل گیری مطالعات جنسیت در باستان شناسی 29-28

2-4-2-1- باستان شناسی نوین 29

2-4-2-2- باستان شناسی دهه80 31-29

2-4-3- اهداف فعالیت های دهه های 60- 80 میلادی 32

2-4-4- روند شکل گیری باستان شناسی جنسیت 33-32

2-4-4-1- باستان شناسی جنسیت 33

2-4-4-2- جنبش زنان و باستان شناسی جنسیت 35-34

2-4-4-3- گردهمایی ها و کنفرانس های باستان شناسی جنسیت 36-35

2-4-4-3-1- گردهمایی چاکمول 38-36

2-5- زنان و باستان شناسی آمریکا 38

2-6- زنان و باستان شناسی استرالیا 39

2-7- جنسیت در باستان شناسی پیش تاریخی و تاریخی 42-40

2-8- ارزیابی مطالعات زنان در باستان شناسی 42

2-9- تاریخچه حضور زنان در مطالعات باستان شناسی جهان 44-43

2-9-1- زنان پیشگام در باستان شناسی جهان- 44

2-9-1-1- ژان دیولافوا- 46-45

2-9-1-2- استرون دیمن— 48-47

2-9-1-3- مارگارت موری—— 51-49

2-9-1-4- گرترود بل———— 54-52

2-9-1-5- هریت بوید هادز-ادیت هیوارد هال دوان—- 56-54

2-9-1-6- هتی گلدمن- ترزا جئول– 58-56

2-9-1-7- گرترود ـ تامسون،گارود و وینفرد لمب— 63- 59

2-9-1-8- ماری لیکی 65

2-9-1-9- هلن کنتور 66

فصل 3- تاریخچه شکل گیری باستان شناسی در ایران و حضور زنان در فعالیت های باستان شناختی 68

3-1- مقدمه 68

3-2- باستان شناسی ایران 68

3-2-1- شکل گیری باستان شناسی ایران 70-68

3-2-1-1- شکل گیری باستان شناسی در ایران توسط فرانسویها 73-70

3-2-1-2- گسترش فعالیت های باستان شناسی در ایران توسط خارجیها 75-73

3-2-1-3- شروع فعالیت های گسترده باستان شناسان ایرانی 76-75

3-2-1-3-1- فعالیت های باستان شناسی ایران همزمان با انقلاب 76

3-2-1-3-2- فعالیت های باستان شناسی ایران بعد از انقلاب 77

3-2-2- تاریخچه حضور زنان در باستان شناسی ایران 78

3-2-3- زنان پیشگام در باستان شناسی ایران 79

3-2-3-1- بانو پروین برزین 79

3-2-3-2- بانو زهرا نبیل 80

3-2-3-3- بانو نوشین دخت نفیسی 81

3-2-3-4- بانو ملکه ملکزاده بیانی 82

3-2-3-5- بانو سیمین دانشور 84

3-2-3-6- بانو سیمین لک پور 85

3-2-3-7- بانو آرمان شیشه گر 87

3-2-3-8- بانو زهره روح فر 90

3-2-3-9- بانو حمیده چوبک 91

3-2-3-10- بانو هایده لاله 92

فصل 4- عوامل تأثیر گذار در انتخاب/ عدم انتخاب رشته باستان- شناسی توسط زنان در ایران 94

1-4- مقدمه 94

4-2- عوامل مؤ ثر در انتخاب رشته باستان شناسی توسط زنان 95

4-3- عوامل بازدارنده انتخاب رشته باستان شناسی توسط زنان 95

4-4- محیط فعالیت های باستان شناسی و زنان 96

4-5- حوزه های پژوهشی باستان شناسی و زنان 97

4-6- بررسی جواب سوالات به صورت نموداری 98

فصل 5- نگاهی به پژوهش هاوتفاسیر باستان شناسی ازمنظر جنسیت و زنان 105

5-1- مقدمه 105

5-2- فرآیند شکل گیری مطالعات زنان در باستان شناسی 105

5-3- نظرات مربوط به تقسیم کار جنسیتی در جوامع گذشته 108

5-4- جنسیت در بین گردآورندگان 109

5-5- نقش زن در جوامع گردآورنده و شکارگر 112

5-6- جنسیت در بین جوامع کشاورز 104

5-7- جنسیت در محوطه باستانی حسنلو و جوامع پیچیده ساسانی 117

5-7-1- زنان و سنجاق در ایران باستان 118

5-7-1-1- حسنلو 118

5-7-1-2- سنجاق به منزله نشانه مراحل مهم در زندگی زنان 120

5-7-1-3- سنجاق به منزله ابزار دفاعی 120

5-7-1-4- سنجاق به منزله نماد جامعه ای مسلح 121

5-7-2- نقش زنان در امپراتوری ساسانی 122

5-8- بررسی تقسیم کار جنسیتی در بین اقوام زنده 124

5-8-1- بررسی جامعه واشوها 124

5-8-2- بررسی جامعه هادزاها 125

5-8-3- بررسی جوامع تیوی ها 125

5-8-4- بررسی جامعه اسکیموها 126

5-9- سفالگری و زنان 130

نتیجه گیری 134

فهرست نمودار ها

نمودار 4-6-1: درصد دانشجویان کارشناسی…………. 98

نمودار 4-6-2: درصد دانشجویان کارشناسی ارشد…….. 99

نمودار 4-6-3: تعداد زنان در هئیت های علمی.. ……….. 100

نمودار 4-6-4: درصد مجوز فعالیت های زنان……………… 101

نمودار 4-6-5: درصد پست های مدیریتی زنان…………….. 102

نمودار 4-6-6: حوزه مناسب فعالیت های زنان ……………103

فهرست تصاویر

تصویر ‏2-1: ژان دیولافوا-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——- 45

تصویر ‏2-2: استرون دیمن-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—— 47

تصویر ‏2-3: دیمن،کاوش در شمال غرب روم —— 49

تصویر 2-4: مارگارت موری-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—– 49

تصویر ‏2-5: موری،کار میدانی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد— 51

تصویر ‏2-6: گرترود بل-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——– 52

تصویر ‏2-7: بل در عراق-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——– 54

تصویر ‏2-8: هریت بوید هادز-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 54

تصویر 2-9: ادیت هیوارد هال دوان—————- 54

تصویر ‏2-10: محوطه باستانی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد– 56

تصویر ‏2-11: هتی گلدمن-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—– 56

تصویر ‏2-12: ترزا جئول-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——- 56

تصویر ‏2-13: کشف بنای نمرود-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد- 58

تصویر ‏2-14: گرترود ـ کاتون تامسون————- 59

تصویر2-15 : دوروتی گارود-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 60

تصویر ‏2-16: گارود در محوطه باستانی زارزی——- 60

تصویر ‏2-17: گارود به همراه دانشجویانش——— 62

تصویر ‏2-18: وینفرد لمب-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—— 62

تصویر ‏2-19: کتلین کنیون-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—– 63

تصویر 2-20: کنیون ـ ویلر-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 64

تصویر ‏2-21: روش کاوش کنیون ـ ویلر———– 64

تصویر‏2‑22: ماری لیکی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——– 65

تصویر‏2‑23: هلن کنتور-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——– 66

تصویر ‏3-1: بانو نوشین دخت نفیسی————– 81

تصویر ‏3-2: بانو ملکه ملکزاده بیانی————— 82

تصویر3-3: بانو سیمین دانشور-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد– 84

تصویر ‏3-4: بانو آرمان شیشه گر-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد- 86

تصویر3-5: کاوش در جوبجی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 88

تصویر ‏3-6: بانو زهره روح فر-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 89

فهرست تصاویر

تصویر ‏3-7: بانو حمیده چوبک-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد– 90

……………………………….25

2-10 سفال سدۀ های نخستین اسلامی…………………………………………………………………………………………………..27

فصل سوم: پیشینه­ی هنر قالیبافی……………………………………………………………………………………………………..29

3-1 قالیبافی در ایران پیش از اسلام………………………………………………………………………………………………………….30

3-2 قالیبافی در ایران بعد از اسلام…………………………………………………………………………………………………………..30

3-3 قالی کلاردشت…………………………………………………………………………………………………………………………………….32

3-3-1 تاریخچه قالی کلاردشت…………………………………………………………………………………………………………………33

3-3-2 نظریات متعدد در مورد قالی کلاردشت…………………………………………………………………………………………34

3-3-3 الیاف مورد استفاده در قالی کلاردشت…………………………………………………………………………………………..35

3-3-4 ابزار مورد استفاده در قالی کلاردشت…………………………………………………………………………………………….37

3-3-5 رنگ و رنگرزی در قالی کلاردشت…………………………………………………………………………………………………38

3-4 طبقه بندی انواع طرح در قالی کلاردشت………………………………………………………………………………………….40

3-4-1 طرح جنگلی……………………………………………………………………………………………………………………………………40

3-4-2 طرح صندوقی…………………………………………………………………………………………………………………………………41

3-4-3 طرح شمله ای………………………………………………………………………………………………………………………………..43

3-4-4 طرح های منسوخ شده…………………………………………………………………………………………………………………..44

3-5 نگارۀ جانوری……………………………………………………………………………………………………………………………………….45

3-6 نگارۀ انسانی…………………………………………………………………………………………………………………………………………48

3-7 نگارۀ گیاهی………………………………………………………………………………………………………………………………………..48

3-8 نگارۀ انتزاعی از اشیاء و زندگی پیرامون……………………………………………………………………………………………..52

3-9 نگارۀ هندسی………………………………………………………………………………………………………………………………………55

فصل چهارم: بررسی تأثیر نقوش سفال کلار بر روی قالی کلاردشت……………………………………………57

4-1 بررسی تأثیر نقوش سفال کلار بر روی قالی کلاردشت……………………………………………………………………..58

فصل پنجم: نتیجه گیری و پیشنهادات………………………………………………………………………………………………69

5-1 نتیجه گیری………………………………………………………………………………………………………………………………………..70

5-2 پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………………………………………..73

فصل ششم: منابع…………………………………………………………………………………………………………………………………….74

فهرست اشکال و تصاویر

عنوان

شکل2-1 مناطق چهار گانه در محوطه اسلامی شهر دِلِه

شکل2-2 سفال دورۀ اسلامی شهر دِلِه

شکل3-1 طرح دفتین

شکل3-2 طرح کاردک

شکل3-3 طرح قیچی

شکل3-4عکس چگونگی رنگرزی

شکل3-5 عکس نمونه طرح جنگلی

شکل3-6 عکس نمونه طرح صندوقی

شکل3-7 عکس نمونه طرح شمله ای

شکل3-8 طرح نگارۀ گوزن و آهو

شکل3-9 طرح نگارۀ چنگ گربه(پیچا چنگ)

شگل3-10 طرح نگارۀ پرندگان

شکل3-11 طرح نگارۀ بلبلک

شکل3-12 طرح نگارۀ پنجه گرگ(ورگ چنگ)

شکل3-13 طرح نگارۀ دم روباه

شکل3-14 طرح نگارۀ استخوان ماهی

شکل3-15 طرح نگارۀ انسانی

شکل3-16 طرح نگارۀ کوه

شکل3-17 طرح نگارۀ درخت

شکل3-18 طرح نگارۀ گل ستاره

شکل3-19 طرح نگارۀ گل پمپال

شکل3-20 طرح نگارۀ گل شیرینی

شکل3-21 طرح نگارۀ آب روان

شکل3-22 طرح نگارۀ گل مخملی

شکل3-23 طرح نگارۀ پله ای(آب روان)

شکل3-24 طرح نگارۀ گل لاله

شکل3-25 طرح نگارۀ گل گرد

شکل3-26 طرح نگارۀ گل گلدان

شکل3-27 طرح نگارۀ گل شاه عباسی

شکل3-28 طرح نگارۀ ول زلفک

شکل3-29 طرح نگارۀ درب دیگ

شکل3-30 طرح نگارۀ حلواقجل

شکل3-31 طرح نگارۀ لمپا

شکل3-32 طرح نگارۀ شانه میک

شکل3-33 طرح نگارۀ کریش

شکل3-34 طرح نگارۀ ترازو

شکل3-35 طرح نگارۀ لانه زنبور

شکل3-36 طرح نگارۀ قیچی

شکل3-37 طرح نگارۀ صندوقی

شکل3-38 طرح نگارۀ گل چارواز

شکل3-39 طرح نگارۀ حلواقجل

شکل3-40 طرح نگارۀ مجمه

شکل3-41 طرح نگارۀ پنجه گرگ

شکل3-42 طرح نگارۀ کلاه خان

شکل4-1 طرح سردوک گلی و سفالی

شکل4-2 طرح سفال تپه کلار و خطوط مواج و شیاری

شکل4-3 طرح سفال دورۀ اسلامی شهر دِلِه

شکل4-4 طرح سفال کلار با طرح نمد و فرش همراه با نقش مایه زیگزاگ

شکل4-5طرح و عکس استفاده از لچکی در زاویه نمد و فرش

شکل4-6 طرح سفال کلار و طرح نمد و فرش با نقش مایه درب دیگ

شکل4-7طرح نقش مایه قلاب زلفک در نمد، فرش، سفال

شکل4-8 طرح نقش مایه لوزی در سفال، نمد، فرش

شکل4-9 طرح نقش هندسی در سفال و نمد

شکل4-10 نقش گیاهی در سفال و قالی

موضعی……………………………………………………………………………………………………………………………………………..13

1-7-2 درمان سیستماتیک………………………………………………………………………………………………………………………………………..13

1-7-3 کولونوسکپی………………………………………………………………………………………………………………………………………………13

• لاپاراسکپی………………………………………………………………………………………………………………………………………………13

1-7-6جراحی باز……………………………………………………………………………………………………………………………………………………13

1-7-7 شیمی درمانی……………………………………………………………………………………………………………………………………………..14

1-7-8درمان بیولوژیکی………………………………………………………………………………………………………………………………………….14

1-7-9 پرتو درمانی………………………………………………………………………………………………………………………………………………..14

1-7-9-1 انواع درمان با اشعه………………………………………………………………………………………………………………………………….14

1-8 ALCAM……………………………………………………………………………………………………………………………………………………15

1-9ویژگی های عمومیALCAM………………………………………………………………………………………………………………………….15

1-10شناساییALCAM به عنوان یک هدف با انکولوژی………………………………………………………………………………………..16

مساله تحقیق………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….19

فصل دوم:مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1 نقش ALCAM در درمان سرطان………………………………………………………………………………………………………………….20

فصل سوم: مواد و روش ها

3-1 مواد مورد استفاده……………………………………………………………………………………………………………………………………………23

3-1-1 باکتری مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………………………………………..23

3-1-2 پلاسمید ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………23

3-1-3 انزیم ها …………………………………………………………………………………………………………………………………………………….23

3-1-4 کیت های ازمایشگاهی. ………………………………………………………………………………………………………………………………24

3-1-5 انتی بیوتیک ها. ………………………………………………………………………………………………………………………………………….24

3-1-6 محیط کشت باکتری …………………………………………………………………………………………………………………………………..25

3-1-7 ژل الکتروفورز……………………………………………………………………………………………………………………………………………25

3-1-8 مواد شیمیایی. …………………………………………………………………………………………………………………………………………….25

3-1-9 وسایل و تجهیزات آزمایشگاهی …………………………………………………………………………………………………………………..25

3-2 انالیز بیوانفورماتیکی ناحیه C2 پروتئین ALCAM. ………………………………………………………………………………………….29

3-2-1 استخراج توالی ناحیه C2 پروتئیین ALCAM ………………………………………………………………………………………………29

3-2-2 بهینه سازی توالی یا Optimization …………………………………………………………………………………………………………29

3-3 سنتز شیمیایی DNA ناحیهC2 پروتئین ALCAM ……………………………………………………………………………………………….29

3-3-1 سنتز شیمیایی ژن نوترکیب ……………………………………………………………………………………………………………………………..29

3-3-2 پایداری و شرایط نگهداری DNA سنتز شده ……………………………………………………………………………………………………..30

3-3-3 محلول سازی DNA لیوفیلیزه………………………………………………………………………………………………………………………….30

3-4 کلونینگ پلاسمید- AMP⁺pBSK حاوی DNA ناحیهC2 پروتئینALCAM ………………………………………………30

3-4-1 آماده سازی باکتری شایسته…………………………………………………………………………………………………………………………..30

3-4-1-1 مواد و محلول ها…………………………………………………………………………………………………………………………………….30

3-4-1-2 روش کار………………………………………………………………………………………………………………………………………………30

3-4-2 ترانسفورماسیون پلاسمید به سلول های مستعد TOP10 E.coli.. ………………………………………………………………..31

3-4-2-1 روش کار……………………………………………………………………………………………………………………………………………..31

3-4-3 ارزیابی کلونی ها………………………………………………………………………………………………………………………………………..32

3-4-4 استخراج پلاسمید – AMP⁺pBSK حاوی DNA ناحیه C2……………………………………………………………………..33

3-4-5 تایید آنزیمی پلاسمید استخراج شده……………………………………………………………………………………………………………..35

3-4-5-1 هضم آنزیمی دوگانه یا Double digestion…………………………………………………………………………………………..35

3-4-5-2 الکتروفورز…………………………………………………………………………………………………………………………………………….35

3-5 ساب کلونینگ ژن ناحیهC2 پروتئین ALCAM……………………………………………………………………………………………….37

3-5-1 تخلیص DNA ناحیهC2 از ژل………………………………………………………………………………………………………………….37

3-5-2 لایگیشن…………………………………………………………………………………………………………………………………………………….38

3-5-3 ترانسفورماسیون………………………………………………………………………………………………………………………………………….39

3-5-3-1 آماده سازی سلول های شایسته…………………………………………………………………………………………………………………39

3-5-3-2 ترانسفورماسیون سلول های شایسته E.coli BL21(DE3) با محصول لایگیشن…………………………………………40

3-5-4 ارزیابی کلونی ها………………………………………………………………………………………………………………………………………..40

3-5-5 استخراج پلاسمید بیانی pet-28a حاوی ژن ناحیهC2 پروتئین ALCAM……………………………………………………..41

3-5-6 تایید آنزیمی پلاسمید استخراج شده……………………………………………………………………………………………………………..42

3-6 بیان پروتئین مولتی توپ EpCAM………………………………………………………………………………………………………………..43

3-6-1 القاء بیان پروتئین………………………………………………………………………………………………………………………………………..43

3-6-2 بررسی بیان به کمک تکنیک SDS-page…………………………………………………………………………………………………….43

3-6-2-1 روش ساخت محلول ها و ژل ها……………………………………………………………………………………………………………..44

3-6-2-2 Run کردن نمونه ها……………………………………………………………………………………………………………………………..45

3-6-2-3 رنگ آمیزی با کوماسی G-250 کلوئیدی………………………………………………………………………………………………….45

فصل چهارم:نتایج

4-1 نتایج حاصل از بهینه سازی توالی ………………………………………………………………………………………………………………………….47

C2ناحیهDNA4-2 سنتز شیمیایی………………………………………………………………………………………………….50

4-3کلونینگ پلاسمید AMP+ -pBSK حاویDNA ناحیهC2…………………………………………………………………………………….52

4-4 ساب کلونینگ ژن ناحیه C2……………………………………………………………………………………………………………………………….54

4-5بیان پروتئینC2 و تایید آن به کمک تکنیک SDS_page…………………………………………………………………………………………..57

فصل پنجم:

بحث…………………………………………………………………………………………………………………………59

نتیجه گیری………………………………………………………………………………………………………………………………..69

منابع…………………………………………………………………………………………………………………………………………71

چکیده انگلیسی………………………………………………………………………………………………………………………………..74

فهرست شکل ها:

شکل 1-1 تصویر بخش های مختلف روده بزرگ………………………………………………………………………………………………………5

شکل1-2 نمای کلی روده بزرگ، روده کوچک و معده……………………………………………………………………………………………….6

شکل1-3 درصد فراوانی محل آناتومیک سرطان کولورکتال ………………………………………………………………………………………..7

شکل1-4 درصد فراوانی مراحل سرطان کولورکتال…………………………………………………………………………………………………..12

شکل1-5 نقشه ژنتیکی پروتئین ALCAM…………………………………………………………………………………………………………….15

شکل1-6 رنگ آمیزی ایمنوهیستوشیمیایی ALCAM در بافت توموری…………………………………………………………………….17

شکل3-1 نقشه ژنی پلاسمید Pet28a…………………………………………………………………………………………………………………….24

شکل3-2 دستگاه انکوباتور……………………………………………………………………………………………………………………………………25

شکل3-3 دستگاه اتوکلاو………………………………………………………………………………………………………………………………………26

شکل3-4 دستگاه مولد ولتاژو تانک الکتروفورز………………………………………………………………………………………………………..26

شکل3-5 شیکر انکی باتور…………………………………………………………………………………………………………………………………….27

شکل3-6 سانتریفیوژ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..27

شکل3-7 دستگاه تصویر ساز ژل……………………………………………………………………………………………………………………………27

شکل3-8 ترموسایکلر……………………………………………………………………………………………………………………………………………28

شکل3-9 بن ماری ………………………………………………………………………………………………………………………………………………28

شکل3-10 کیت استخراج پلاسمید…………………………………………………………………………………………………………………………33

شکل3-11 کیت استخراج DNA از ژل فرمانتاز………………………………………………………………………………………………………37

شکل4-1 شاخص سازی کدون. سمت راست: قبل از بهینه سازی سمت چپ: بعد از بهینه سازی…………………………………..48

شکل4-2 میزان فراوانی کدون های بهینه. سمت چپ: قبل از بهینه سازی سمت راست:بعد از بهینه سازی ……………………..48

شکل4-3 شاخص سازی محتوای G-C سمت راست:قبل از بهینه سازی سمت چپ: بعد از بهینه سازی………………………..49

شکل4-4ترادف ناحیهC2 مورد نظر پس از بهینه سازی کدون های مربوطه جهت بیان در میزبان E.coli………………………49

شکل4-5 مقایسه نوکلئوتید بصورت نظیر به نظیر در توالی های اولیه و بهینه سازی شده……………………………………………….50

شکل4-6 تائید اندازه ژن سنتز شده به کمک هضم آنزیمی…………………………………………………………………………………………51

شکل4-7 نقشه ژنی پلاسمید حاوی DNA ناحیه C2 پروتئینALCAM…………………………………………………………………53

شکل4-8 تائید حضور پلاسمید حاوی ژن ناحیه C2 در محصول استخراج پلاسمید…………………………………………………….53

شکل4-9 هضم دوگانه آنزیمی پلاسمید تکثیر یافتهPBSK……………………………………………………………………………………….54

شکل4-10 نقشه ژنی پلاسمید Pet28a………………………………………………………………………………………………………………….55

شکل4-11 باکتری های BL21(DE3) ترانسفورم شده با Pet28a حاوی ژن ناحیه C2…………………………………………….55

شکل4-12 تائید حضور پلاسمید Pet28a حاوی ژن ناحیه C2 در باکتری ترانسفورم شده BL21(DE3) ………………….56

شکل4-13 نتیجه حاصلهاز هضم آنزیمی دوگانه پلاسمید Pet28a حاوی ژن ناحیه C2………………………………………………57

شکل4-14 بررسی بیان پروتئین ناحیه C2 به کمک تکنیک SDS-Page………………………………………………………….58

چکیده:

همة سرطان ها از سلول ها شروع می شوند به طور طبیعی ، سلول ها به گونه ای که بدن به آنها نیاز دارد، رشد می كنند و تقسیم می شوند. سلول های جدید زمانی كه لزومی به وجود آنها نیست، به وجود می آیند و یا سلول های پیر در زمان مرگ به حیات خود ادامه می دهند. این سلول های اضافی توده بافتی به نام تومور تشکیل می دهند.

سرطان کولورکتال یکی از شایع ترین سرطان های بدخیم در سرتاسر جهان می باشد که میزان ابتلا به آن حدود 6/0 می باشد که منجر به مرگ600 هزار نفر در سال می گردد. .CD166 به عنوان مارکر سلول های بنیادی سرطان کولورکتال شناسایی و معرفی شده است.که با توجه به بیان آن بر سطح سلول های سرطان کولورکتال در مراحل مختلف بیماری می توان از آن جهت کارهای درمانی و تشخیصی استفاده نمود.

ALCAM مارکر تشخیصی مثبتی برای بقای کلی بیماران مبتلا به سرطان کولورکتال می باشد و شناسایی آن ممکن است به بهینه سازی سیتسم مرحله بندی تشخیصی موجود کمک کند.ALCAMمعمولا در سرطان کولورکتال روشن بوده و مارکر تشخیصی مستقل جدیدی می باشد که بر اهمیت ان در پیشروی تومور در سرطان کولورکتال تاکید شده است.

در این مطالعه ما ابتدا سعی بر آن داشتیم توالی مورد نظر را از بانک های اطلاعاتی ژنی استخراج نماییم و سپس از طریق آنالیز بیوانفورماتیکی توالی مورد نظر را از نظر بهترین بیان در میزبان باکتریایی آماده نماییم.ژن مورد نظر از طریق شیمیایی سنتز شده و سپس با استفاده از فرایند کلونینگ، قطعه ژنی سنتز شده را به کمک پلاسمید بیانی pet-28a درون سیستمپروکاریوتیانتقال داده و تکثیرنموده. در انتها نیز بیان ناحی C2در باکتری های نوترکیب با القاگر مناسب القا می نماییم و وجود پروتئین مورد نظر را به کمک تکنیک SDS-page مورد بررسی قرار می دهیم.

ناحیه C2 می تواند به مانند پروتئین اصلی خاصیت ایمنی زائی داشته باشد. این قطعه ژنی توانایی کلون شدن در میزبان پروکاریوتی را دارا بوده و باکتری قادر است به کمک القاگر مناسب به میزان فراوانی پروتئین مورد نظر را تولید کند. از این جهت می توان از این پروتئین نوترکیب برای تهیه کیت تشخیصی سرطان کولورکتال به واسطه تکنیک الایزا استفاده برد. همچنین می توان با تزریق این پروتئین نوترکیب به عنوان واکسن، سیستم ایمنی فرد را جهت پیش گیری از ابتلا به سرطان تقویت نمود.

واژه های کلیدی:

سرطان کولورکتال، ALCAM، ناحیه C2 پروتئینALCAM ،کلونینگ

فصلاول

مقدمه

1-1سرطان چیست

اصطلاح سرطان به تومورهای اطلاق می شود که می توانند به بافت های مجاور خود که از سلول­های سالم تشکیل میشوند حمله کنند توانایی مجاورت و هجوم سلول های توموری عامل طبقه بندی تومورها به دو دسته خوش خیم و بدخیم است اگر یک تومور بدخیم به یک رگ خونی یا لنفی[1] برسد می تواند متاستاز [2]دهد ودر بافت های دیگری رشد کند. نئوپلاسم(که معنی آن رشد جدید است) شکل غیر طبیعی رشد سلول­ها است و تومور، نئپلاسمی است که با وضعیت بیمار گونه همراه است، تومور ها بیماری هایی هستند که در آنها جمعیتی از سلول های، که به لحاظ ژنتیکی هم خانواده هستند توانایی رشد نا به هنجار را کسب می کنند(نخعی سیستانی وهمکاران 1389). همة سرطان ها از سلول ها شروع می شوند كه واحد سازنده بدن و اساس زندگی محسوب می شوند. سلول ها بافت را می سازند و بافت های بدن، اندام ها را تشكیل می دهند. به طور طبیعی ، سلول ها به گونه ای که بدن به آنها نیاز دارد، رشد می كنند و تقسیم می شوند. سلول های پیر می میرند وسلول های جدید جای آنها را می گیرند.

گاهی نظم مراحل رشد به هم می خورد. سلول های جدید زمانی كه لزومی به وجود آنها نیست، به وجود می آیند و یا سلول های پیر در زمان مرگ به حیات خود ادامه می دهند. این سلول های اضافی توده بافتی به نام تومور تشکیل می دهند.

تومورها خوش خیم یا بد خیم می باشند.

تومورهای خوش خیم سرطانی نیستند.

• این نوع تومورها به ندرت زندگی فرد را تهدید می کنند.

• بیشتر تومورهای خوش خیم قابل جراحی بوده و معمولا عود نمی کنند.

• تومورهای خوش خیم، به بافت های اطراف و سایر قسمت های بدن گسترش نمی یابند.

تومورهای بدخیمسرطانی هستند.

• عموما این تومورها بسیار خطرناك تر از تومورهای خوش خیم بوده و زندگی فرد را تهدید می کنند.

• تومورهای بدخیم قابل جراحی بوده ولی در مواردی بعد از عمل جراحی مجددا عود می كنند.

2- 4- نشانگرهای ژنتیکی.. 42

2- 5- نشانگرهای مورفولوژیکی.. 42

2- 6- نشانگرهای مولکولی.. 43

2- 7- نشانگرهای پروتئینی یا بیوشیمیایی.. 44

2- 8- نشانگرهای DNA.. 45

2- 8- 1- نشانگرهای DNA غیر مبتنی بر PCR.. 46

2- 8- 2- نشانگرهای مبتنی بر PCR.. 46

2- 9- نشانگرهای غیر اختصاصی.. 47

2- 9- 1- RAPD.. 47

2- 10- نشانگرهای اختصاصی.. 48

2- 10- 1- AFLP. 48

2- 10- 2- SSR.. 48

2- 10- 3- RFLP-PCR.. 50

2- 10- 4- RFLP Based PCR با اتصال ناقص… 51

فصل سوم مواد، تجهیزات و روش تحقیق.. 52

3- 1- استخراج کوتین.. 55

3- 2- نمونه برداری.. 55

3- 3- غربالگری و جداسازی گونه­های تولیدکننده آنزیم کوتیناز 55

3- 4- تهیه slant از سویه­های جدا شده 57

3- 5- نگهداری طولانی مدت سویه­ها 57

3- 6- تهیه گلیسرول. 58

3- 7- تهیه محیط کشتLB.. 58

3- 8- Assay آنزیمی.. 58

3- 9- Assay ویژه آنزیمی.. 60

3- 10- استخراج DNA.. 60

3- 10- 1- استخراج DNA به روش جوشاندن. 60

3- 10- 2- استخراج DNA به رو ش CTAB.. 61

3- 10- 3- روش استخراج DNA با کیت.. 64

3- 11- اندازه­گیری کیفیت و غلظت DNA.. 65

3- 12- رنگ آمیزی با اتیدیوم برماید. 69

3- 13- واكنش زنجیره ای پلیمراز Polymerase Chain Reaction. 70

3- 14- راه اندازی واکنش PCR.. 74

3- 15- برنامهPCRبرای نشانگرRAPD.. 76

3- 16- توالی­یابی سویه­های تولیدکننده آنزیم کوتیناز با استفاده از 16S rDNA.. 77

3- 17- الکتروفورز محصولات واکنش PCR.. 78

فصل چهارم. 80

4- 1- بررسی میزان کوتین در میوه­های مختلف.. 81

4- 2- جداسازی سویه­ها 87

4- 3- بررسی فعالیت آنزیم کوتیناز در نمونه­ها 87

4- 4- نتایج بررسی کیفیت DNA بعد از استخراج. 88

4- 5- تجزیه و تحلیل تنوع ژنتیکی 6 سویه بر اساس نشانگر مولکولی RAPD.. 89

4- 6- نتایج حاصل از تجزیه خوشه­ای بر اساس نشانگر RAPD.. 89

4- 7- تجزیه به مختصات اصلی.. 90

4- 8- نتایج تجزیه باندهای حاصل از 8 پرایمر RAPD.. 92

4- 9- ضریب همبستگی کوفنتیک… 93

4- 10- شناسایی و توالی یابی سویه­ها با استفاده از 16S rDNA.. 93

فصل پنجم. 95

5- 1- استخراج کوتین.. 96

5- 2- سنجش فعالیت آنزیمی کوتیناز 97

5- 3- استخراج DNA.. 98

5- 4- تنوع ژنتیکی با استفاده از نشانگر RAPD.. 98

پیشنهادات.. 100

6- 1- پیشنهادات.. 101

فهرست جدول ها

جدول ‏2‑1 مطالعه ساختار- عملکرد کوتیناز به کمک تکنی­کهای مختلف… 24

جدول ‏2‑2 فعالیت هیدرولازی کوتیناز نسبت به تنوع گستردهای از سوبستراها 29

جدول ‏2‑3 روش­های آماده­سازی کوتیناز 30

جدول ‏3‑1 مواد مورد استفاده در پایان­نامه. 53

جدول ‏3‑2 مشخصات کامل مواد شیمیایی مورد نیاز در عملیات استخراج DNA… 61

جدول ‏3‑3 مواد مورد استفاده برای تهیه بافر TBE(10X) 68

جدول ‏3‑4 مشخصات پرایمرهای RAPD… 73

جدول ‏3‑5 مواد مورد نیاز PCR.. 75

جدول ‏3‑6 مواد مورد نیاز PCR با مستر میکس اماده 76

جدول ‏3‑7 برنامه واکنش PCR مورد استفاده برای نشانگر RAPD… 76

جدول ‏3‑8 برنامه واکنش PCR برای پرایمرهای 16S rDNA.. 77

جدول ‏3‑9 مواد مورد نیاز برای انجام PCR 6 نمونه با پرایمرهای16S rDNA.. 78

جدول‏3‑10 16S rDNA primer. 78

جدول ‏4‑1بررسی میزان کوتین.. 82

جدول ‏4‑2 بررسی میزان کوتین در خیارسبز. 83

جدول ‏4‑3 بررسی میزان کوتین در سیب زرد. 84

جدول ‏4‑4 بررسی میزان کوتین در سیب قرمز. 85

جدول ‏4‑5 تجزیه واریانس وزن کوتین نهایی بین میوه­ها 85

جدول‏4‑6 مقایسه میانگین میوه­ها به روش دانکن در سطح احتمال 1% برای صفت وزن کوتین نهایی.. 86

جدول ‏4‑7 فعالیت کوتینازی 6 نمونه. 88

جدول ‏4‑8 نتایج پرایمرهای RAPD حاصل از الکتروفورز افقی نمونه­ها 89

فهرست شکل ها

شکل ‏2‑1 ترسیم نمای ساختمان پوستک گیاه A) مرحله گستردگی کامل برگ B) تصویری با میکروسکوپ الکترونی از پوستک برگ بزرگنمایی 51000 برابر. 9

‏2‑2 مولکول کوتین و مونومرهایی که از هیدرولیز آن بدست می آید. 10

شکل ‏2‑3 نمایش شماتیکی از کوتیکول.. 11

شکل ‏2‑4 a) ساختمان غیر مشخص و بینظم کوتیکول با میکروسکوپ الکترونی b) برآمدگی­های کوتین میوه گوجه­فرنگی با میکروسکوپ الکترونی.. 11

شکل ‏2‑5 a) توالی پروتئینی آنزیم کوتیناز b) مکانیسم عمل آنزیم کوتیناز 16

شکل ‏2‑6 هیدرولاز آلفا و بتا 20

شکل ‏2‑7 ساختار کوتیناز 21

شکل ‏2‑8 توانایی تجزیه (a) و سنتز(b) ترکیبات پلی استری توسط آنزیم کوتیناز 28

شکل‏2‑9 مکانیسم عمل کوتیناز 40

‏2‑10 گسترهی مقاومت آنزیم کوتیناز در برابر دما وpH 41

شکل ‏2‑11نمودار دما و pH… 41

شکل ‏2‑12 دسته­بندی نشانگرهای ژنتیکی.. 44

شکل ‏3‑1 تهیه ژل آگارز 68

شکل ‏4‑1مراحل مختلف استخراج کوتین در گوجه­فرنگی.. 81

شکل ‏4‑2 مراحل مختلف استخراج کوتین در خیارسبز. 82

1-2-2مشخصات بنزین 9

1-3منشا گوگرد 16

1-3-1هیدروژن سولفید 18

1-3-2تیول ها 18

1-3-3سولفید ها 18

1-3-4 دی سولفید ها 18

1-3-5تیوفن و مشقاتش 19

1-4مضرات گوگرد و دلایل حذف آن 19

1-5شباهت گوگرد زدایی با نیتروژن زدایی 20

1-6روش های گوگرد زدایی 2

1-6-1گوگرد زدایی باکتریولوژی 21

1-6-2گوگرد زدایی با فلزات و ترکیبات فلزی 21

1-6-3گوگرد زدایی با روش شیمیایی 22

1-6-4گوگرد زدایی به روش اکسیداسیون 22

1-6-5گوگرد زدایی زیستی 22

1-6-6گوگرد زدایی هیدروژنی 22

1-7روش های ملایم کردن 23

1-8واحد تهیه گوگرد در پالایشگاه 24

فصل دوم :کاتالیست 26

2-1تکنولوژی هایکاتالیستیدر صنایع جدید 27

2-1-1چشم انداز آینده 27

2-2کاتالیست 30

2-2-1غیر فعال شدن کاتالیست ها 31

2-2-2واکنش های کاتالیزوری جامد 31

2-2-3مشخصات اصلی کاتالیست ها 32

2-3کاتالیست های فرآیند تصفیه هیدروژنی 32

2-4سنتز سولفید مولیبدن 33

2-5سولفیداسیون اکسیدها 34

2-6پیشینه تحقیق 34

2-6-1فرآیند OATS 34

2-6-1-1نخستین گام ها 35

2-6-1-2بازار پر رقابت 36

2-6-2فرآیند MEROX 36

2-6-2-1بهینه کردن پارامترهای عملیاتی برج مراکس 39

2-6-3فرآیند کلاوس 39

فصل سوم:آزمایشات 40

3-1طراحی آزمایش 41

3-2ساخت کاتالیست 42

3-3راکتور بستر ثابت 43

3-4مراحل انجام آزمایش 44

فصل چهارم:بهینه سازی 50

4-1بهینه سازی و نتایج 51

4-1-1فشار جزئی هیدروژن 52

4-1-2دمای واکنش 52

4-1-3سرعت فضایی 53

4-1-4نسبت هیدروژن به خوراک 53

4-2بهینه سازی پارامترهای ساختاری 53

4-3بهینه سازی شرایط عملیاتی 60

4-3-1بهینه سازی فشار 60

4-3-2بهینه سازی دما 63

4-4سینتیک 64

4-5مدل سینتیکی واکنش های هتروژن 64

4-6مدل سینتیکی پیشنهادی 66

4-7بررسی مدل های سینتیکی واکنش گوگرد زدایی هیدروژنی 66

4-9نتایج آزمایش های راکتور انتگرالی 69

4-10بدست آوردن پارامترهای سینتیکی مدل 71

فصل پنجم:نتیجه گیری و پیشنهادات 73

5-1نتیجه گیری 74

5-2پیشنهادات 76

ضمائم 77

مشکلات نشت هیدروژن سولفید 78

دستگاه توتال سولفور 79

سولفورسنج فرآورده های نفتی 80

منابع 81

فهرست جداول

جدول1-1 :ترکیبات انواع بنزین 11

جدول1-2 :درصد وزنی اجزا 13

جدول1-3 :مقایسه بین درصد وزنی و حجمی بنزین سوپر و یورو4 14

جدول1-4 :مقایسه بین آلاینده ها در اردیبهشت 93 15

جدول1-5 : مقایسه بین آلاینده ها در اردیبهشت92 16

جدول 2-1:انواع کاتالیست و کاربردش 28

جدول2-2:فاز فعال آهن و مولیبدن 33

جدول3-1 :وزن کاتالیست ها 45

جدول3-2 :شرایط آزمایش 45

جدول4-1 :سطوح مورد بررسی 54

جدول4-2:طراحی آزمایش برای پارامترهای معرفی شده توسط روش تاگوچی 55

جدول4-3 :آزمایشات اولیه برای بدست آوردن محدوده قابل کنترل شرایط آزمایش 56

جدول4-4 :نتایج آزمایشات انجام شده برای بهینه سازی ساختاری کاتالیست 56

جدول4-5 :نتایج حاصل از دو نرم افزار 57

جدول4-6 :نتایج حاصل از نرم افزار minitab 58

جدول4-7 :نتایج آزمایشات فشار پس از آنالیز 61

جدول4-8 :نتایج آزمایشات سرعت فضایی پس از آنالیز 62

جدول4-9 :نتایج آزمایشات دما پس از آنالیز 63

جدول4-10 :نمونه هایی از مدل سینتیکی 67

جدول4-11 :نتایج آزمایشات سینتیکی 69

جدول4-12 : سرعت مصرف تیوفن 71

جدول4-13 : پارامترهای ارائه شده توسط روش سیمپلکس به 72

کمک نرم افزارsolverبراساس روش بهینه سازی نیوتنی

فهرست نموارها

نمودار4-1:مدل سازی نتایجMo با نرم افزار minitab 59

نمودار4-2: مدل سازی نتایج Coبا نرم افزار minitab 59

نمودار4-3: مدل سازی نتایجTiO₂با نرم افزار minitab 60

نمودار4-4:تغییرات میزان تبدیل تیوفن 70

فهرست اشکال

شکل2-1 :merox unitواحد 300 38