1-2- رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………

3

1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………

3

1-2-2- رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..

4

1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………

4

1-3- پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………

5

1-4- استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….

7

1-5- گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..

8

1-6- سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….

9

1-7- هدف ………………………………………………………………………………………………………………………

11

1-8- فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….

11

فصل دوم: بر تحقیقات انجام شده

2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلیGPX1pro198leu و ارتباط آن با بیماری­های گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………

13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلیSOD1A251G و ارتباط آن با بیماری­ های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..

14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………….. 15

فصل سوم: مواد و روش انجام کار

3-1- نمونه­گیری ………………………………………………………………………………………………………………… 18
3-2- وسایل مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………. 19
3-3- مواد مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………….. 19
3-3-1- محلول­های لازم جهت استخراج ……………………………………………………………………… 19
3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ………………………………………………………………. 20
3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ……………………………………………………….. 20
3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده ………………………………….. 20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ………………. 21
3-4-1- ساخت محلول­های مورد نیاز جهت استخراج ………………………………………………….. 21
3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن …………………………………………………………………. 21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش PCR-RFLP ……………………………………………………………………… 21
3-5-1- PCR ………………………………………………………………………………………………………………… 21
3-5-2- پرایمر­های مورد استفاده ………………………………………………………………………………….. 22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلیGPX1pro198leu ……………………………………………….. 23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلیSOD1A251G …………………………………………………….. 24
3-8- الکتروفورز …………………………………………………………………………………………………………………. 25
3-9- رنگ­آمیزی ژل ………………………………………………………………………………………………………….. 26
3-10- تحلیل آماری ………………………………………………………………………………………………………….. 27

فصل چهارم: نتایج

4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش ………………………………………………………… 29
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه …………………………………………………… 29
4-3- بررسی چند شکلی ژنGPX1pro198leu درافراد سالم و بیماران ………………………. 31
4-4- بررسی چند شکلی ژنGPX1pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………

33
4-5- بررسی چند شکلی ژنSOD1A251G درافراد سالم و بیماران …………………………….. 36
4-6- بررسی چند شکلی ژنSOD1A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………………

38
4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلی­هایGPX1pro198leu وSOD1A251G …………. 40

فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری

5-1- بحث و نتیجه­گیری ……………………………………………………………………………………………………. 43
5-2- پیشنهادات …………………………………………………………………………………………………………………. 47
فهرست منابع……………………………………………………………………………………………………………………. 48

فهرست جدول­ها

 

عنوان صفحه

 

پایان نامه

جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه …………………………………………………………………………….. 18
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ………………………………………………………………………. 22
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژنGPX1در 26 سیکل ………………………. 23
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکیGPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………..

24
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژنSOD1در 30 سیکل ………………………. 24
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکیSOD1A251G ……………………………………………………………………………………………………………………..

25
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند ………………………………………………………………………… 30
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند …………………………………………………………… 30
جدول 4-3: ارتباط سن در رد پیوند کلیه …………………………………………………………………………. 31
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژنGPX1pro198leu درافراد سالم و بیمار ………………………………………………………………………………………………………………………………………

32
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنGPX1 بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..

32
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژنGPX1pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………….

33
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنGPX1 در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………

34
جدول 4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژنGPX1…………………………….. 35
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژنSOD1A252Gدرافراد سالم و بیمار .. 36
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنSOD1در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..

37
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژنSOD1A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………

38
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنSOD1 در بین گروه دارا و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………………..

39
جدول 4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژنSOD1…………………………… 40
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1وSOD1در افراد سالم و بیمار …………. 41
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1وSOD1در بیماران دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………………………..

41
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیت­های متفاوت ………………………………………………………………. 45
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیت­های متفاوت ……………………………………………………………. 46

فهرست شکل­ها

عنوانصفحه

شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیون­پراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکیGPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………

9
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلیSOD1A251G 10
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکیGPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..

26
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکیSOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..

27

مقدمه

1-1–پیوند کلیه

پیوند به معنی جابه­جا کردن سلول­ها، بافت­ها یا اندام­های انسانی از یک فرد اهداکننده به یک فرد گیرنده با هدف بازگرداندن عملکرد یا عملکردهایی به بدن است. به مجموع این سلول­ها، بافت­ها و اندام­­ها، پیوند یا گرافت[1] گفته می­شود، که انواع متفاوتی دارد. پیوند از یک فرد به خودش پیوند اتولوگ[2]، بین افرادی یکسان از نظر ژنتیکی پیوند هم­ژن[3]، بین دو فرد از یک گونه پیوند آلوژن[4] و بین افرادی از گونه­های متفاوت پیوند زنوژن[5] گفته می­شود (Abbas et al, 2011).

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...